扫描电子显微镜SEM用于观测组织或者材料表面形貌的电子显微镜。SEM以高能电子束作为光源，与被测物质发生作用，激发出的二次电子被探测器收集，通过光电倍增管和光电转换器后将图像显示在平屏幕上。
本文以国仪量子SEM5000为例简要介绍SEM观测生物组织的操作方法：
一、准备样品和耗材
1、已干燥完全的样品
2、样品台、导电胶带、镊子、剪刀、手套
剪取适当长度的导电胶带粘在样品台上，用镊子小心夹取样品，放在导电胶上并粘牢（操作过程要带手套）。
二、样品喷金镀膜
由于生物组织不具备导电性，需要在进行SEM观测前进行喷金镀膜，增加形貌衬度。喷金参数根据所在实验室的具体设备而异，需提前与负责老师进行确认。
三、安装样品台
1、打开电脑，双击软件图标；
2、打开软件后，根据提示点击“确定”连接SEM；
3、点击右上角“快速换样”，根据弹窗指示，点击“确定”。此时样品台移动至规定位置；
4、点击交换仓“抽气”按键，开始进行交换仓抽真空操作，直至指示灯常亮，提示真空状态已完成；
5、点击交换仓“开/关传输门”按键，打开交换仓与样品仓之间的隔板
6、打开样品杆锁扣，向内推进样品杆至底部，顺时针转动样品杆旋钮，锁定样品台并向外拉出样品杆，锁上锁扣，此时样品台被样品杆从样品仓中取出至交换仓；
7、再次点点击交换仓“开/关传输门”按键，关闭交换仓与样品仓之间的隔板；
8、点击点击交换仓“放气”按键，解除交换仓真空状态；打开交换仓，放入样品；
9、关上交换仓，依次执行“抽气”、“开/关传输门”推进样品杆操作，待样品台进入指定位置后，逆时针旋转样品杆旋钮，拉出样品杆，关上隔板。
四、SEM观察
1、点击软件右上角“工作”按钮，根据弹窗提示选择样品台；
2、点击软件右上角“打开束流”按钮，开启束流；
3、软件左下角“导航拍照”按钮，导入样品导航界面；
4、根据样品高度和类型在Z轴输入窗口输入数值界定工作高度和样品高度；
5、在样品导航界面用鼠标双击，移动样品位置（此处用于定位不同样品）；
（蓝色为目前位置，红色为鼠标双击选择的位置，样品台从蓝色自动移动至红色位置）
6、在成像界面用鼠标双击，移动样品位置（此处用于移动某一样品不同位置）；
7、鼠标滚轮执行放大缩小操作；
8、点击工具栏“”进行样品预览；
9、点击工具栏“”进行亮度和对比度的调节；
10、放大倍数较小时，点击工具栏“”进行自动聚焦和自动消像散；
11、放大倍数较大时采用手动聚焦，点击工具栏“慢扫”和“选区”将选区框移动至居中位置，按住鼠标右键左右滑动，确定焦点位置（最清晰时），勾掉“选区”后应用于整个视野；
12、点击“”进行拍照，根据弹窗搜索文件夹并给图片命名；
13、点击“”进行下一次拍照。
五、关机
扫描电镜通常不需要关机，通常关闭束流后，点击待机键即可。
本文作者是"花筱福"同学，在获得授权后，实验老司机将本文发表于公众号。
文稿：花筱福
校对：煲仔饭
素材：
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