细胞膜结构变化:细胞膜结构发生改变,磷脂酰丝氨酸外翻,但细胞膜仍然保持完整。
检测方法:常用Annexin V/PI双染色法。Annexin V能与外翻的磷脂酰丝氨酸高亲和力结合,而PI无法透过完整的细胞膜(PI是一种核酸染料,在细胞膜完整的情况下,无法进入细胞染核),因此早期凋亡细胞仅被Annexin V染色,而PI阴性。
DNA降解:DNA被降解为约180~200bp的片段,这是晚凋的一个显著标志。
细胞膜破裂:细胞膜破裂,导致细胞内容物的释放。
检测方法:Annexin V/PI双染色法检测时,PI能透过破裂的细胞膜与DNA结合,因此晚凋细胞同时被Annexin V和PI染色。
细胞膜破裂:坏死细胞的细胞膜破裂早于DNA降解,导致细胞内容物外溢,引起局部炎症反应。
检测方法:与晚凋细胞一样,在坏死细胞中,PI能透过坏死的细胞膜与DNA结合,因此坏死细胞能同时被Annexin V和PI染色。但PI染色会更为强烈一些,因为细胞膜破裂严重。
⑥(PI-/Annexin V+),为早凋细胞,占比是9.20%
⑦(PI+/Annexin V+),为晚凋细胞和坏死细胞,占比是0.16%
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案例2
设门就是在流式细胞仪生成的散点图或直方图上,通过手动或自动的方式划定一个或多个区域(即“门”),这些区域代表了具有特定特征的细胞群体(通俗点说,设门就是选中目标研究细胞群)。
设门的形状可以是任意的,如线性门、矩形门、圆形门、椭圆形门、多边形门和四象限门(十字门)等,具体形状取决于细胞类群分布的特点和研究目的。
数据分析工具不会用?数据挖掘无从下手?