本研究根据课题组前期测定的响应炭疽病侵染的转录组数据筛选到差异基因CsNAC17,CsNAC17在炭疽病菌侵染过程中显著高表达。在烟草中异源过表达CsNAC17显著增强了对炭疽病菌的抗性。酵母文库筛选得到CsNAC17的互作蛋白CsbHLH62,并通过酵母双杂、免疫共沉淀技术、双分子荧光互补、分裂荧光素酶互补等实验进一步验证。在本氏烟中异源过表达CsbHLH62同样增强了对炭疽病菌的抗性。此外,在茶树受到炭疽病伤害时,CsRPM1的表达量显著上调,CsRPM1基因通过识别病原菌释放的效应因子并产生抗性来诱导植物的HR反应。酵母单杂交和双荧光素酶实验表明,CsNAC17通过直接结合CsRPM1启动子中的NACRS(CATGTG)元件来提高CsRPM1的转录水平。重要的是,CsbHLH62单独不与CsRPM1启动子结合,但CsNAC17-CsbHLH62转录复合体导致CsRPM1转录本水平较高。在感病茶树‘龙井43’叶片中分别瞬时过表达CsNAC17、CsbHLH62和CsRPM1,接种炭疽菌后发现叶片上病原菌的生长受到阻碍,对炭疽菌的抗性增强。在抗病茶树‘中茶108’叶片中通过VIGS介导的瞬时沉默抑制CsNAC17、CsbHLH62的表达,导致叶片对炭疽病的抗性减弱。这些结果揭示了CsNAC17/CsbHLH62-CsRPM1调控模块在提高茶树抗炭疽病中的潜在应用价值。
南京农业大学园艺学院博士研究生韩蕊为论文第一作者,黎星辉教授和刘淑婧副教授为论文的通讯作者。南京农业大学园艺学院庄静教授、陈暄教授、王玉花教授等多位课题组人员参与了该工作。研究得到了江苏省重点研发计划项目、国家重点研发计划、国家自然科学基金等项目的资助。
https://doi.org/10.1093/hr/uhae295
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https://doi.org/10.1093/hr/uhae152
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