WB讲座精选|WB条带不理想,常见问题分析:其他条带问题

文摘   2024-12-01 19:00   广东  

本期视频讲解了电泳实验中遇到的多种条带异常问题,并提供了相应的解决方案。


例如:

  1. 微笑条带:可能由电泳迁移速度太快、电泳温度过高或样本盐离子浓度过高造成。解决措施包括降低电压、冰水浴电泳、使用接近生理状态盐离子的裂解缓冲液或透析除盐。

  2. 纵向条纹:可能由样品中的不溶性颗粒物或样本盐离子浓度过高造成。解决措施包括充分裂解样品、延长离心时间、使用接近生理状态盐离子的裂解缓冲液或透析除盐。


  3. 哑铃状条带:可能由配置胶不均一、拔梳子操作不当、样本中有杂质或上样孔有气泡造成。解决措施包括重新配胶、平稳缓慢垂直拔起梳子、离心取上清和轻轻吹打泳道。


  4. 成像结果异常一条带发白:可能由蛋白上样量过大、一抗二抗浓度过高或发光液太灵敏造成。解决措施包括降低抗体或蛋白浓度、使用低灵敏度发光液。

  5. 蛋白质聚集导致形状诡异的狭窄泳道:可能由基因组复合物没有去除造成。解决措施为上样前先去除基因组DNA以降低粘度。




[视频版本]




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