本期视频讲解了电泳实验中遇到的多种条带异常问题,并提供了相应的解决方案。
例如:
微笑条带:可能由电泳迁移速度太快、电泳温度过高或样本盐离子浓度过高造成。解决措施包括降低电压、冰水浴电泳、使用接近生理状态盐离子的裂解缓冲液或透析除盐。
纵向条纹:可能由样品中的不溶性颗粒物或样本盐离子浓度过高造成。解决措施包括充分裂解样品、延长离心时间、使用接近生理状态盐离子的裂解缓冲液或透析除盐。
哑铃状条带:可能由配置胶不均一、拔梳子操作不当、样本中有杂质或上样孔有气泡造成。解决措施包括重新配胶、平稳缓慢垂直拔起梳子、离心取上清和轻轻吹打泳道。
成像结果异常一条带发白:可能由蛋白上样量过大、一抗二抗浓度过高或发光液太灵敏造成。解决措施包括降低抗体或蛋白浓度、使用低灵敏度发光液。
蛋白质聚集导致形状诡异的狭窄泳道:可能由基因组复合物没有去除造成。解决措施为上样前先去除基因组DNA以降低粘度。
[视频版本]
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