前言
类固醇激素是一类脂溶性小分子激素，是由胆固醇经一系列酶催化而来，可分为肾上腺皮质激素和性激素两类，在维持机体正常内分泌，调节性功能、机体发展、免疫调节及生育控制方面 有明确的作用。人体内类固醇激素的升高或者降低与一些临床病，如，先天肾上腺增生、多囊卵巢综合症、内分泌紊乱、肾上腺皮质功能及羟化酶缺乏症等息息相关。各个类固 醇激素作为代谢网络中的节点相互影响，如能详尽表征代谢网络上下游中各激素的含量变化情况，对临床疾病的确诊、机体内分泌状态的监控等具有种重要意义。
临床传统方法采用放射免疫或ELISA试剂盒方法进行激素检测，可能存在抗原抗体假阳性干扰，低浓度水平激素测定不准确等问题。且临床对于不同激素检测方式不同，多激素全面检测所需血液量较大，增加患者负担。液质联用法具有特异性强，检测灵敏度高，适合高通量测定等优点，因此，建立一种基于液质法 的同时准确测定多种类固醇激素的分析方法，对于临床相关疾病 的诊断具有重要的指导意义。
本方法基于液相色谱串联质谱系统，采用同位素内标校正法，建立了一次分析，同时准确检测血清中20种类固醇激素的定量方法。20种类固醇激素相关信息如下。
化合物信息
实验部分
样品前处理
结果与讨论
各化合物在各自出峰位置峰形对称，响应良好。在20种激素 中，17α羟孕酮和21羟基孕酮；11-脱氧皮质醇，21-脱氧皮质醇 和皮质酮为两组同分异构体，在本方法条件下，同分异构体间可 以实现基线分离。典型色谱图如图1。
标准曲线
以PBS为替代基质，制作标准工作曲线。各待测物典型标准 曲线结果如下表。
加标回收率
取混合人血清样本，分为4组，向其中三组加入不同浓度的 20种激素混合标准溶液，制备低、中、高三组血清加标样本，以 随行标曲测定4组血清样本中各激素浓度（各组内3样本分析）。计算加标回收率。各激素在各自加标水平下加标回收率结果如 图2所示。结果表明，各待测物的加标回收率在86.6%-111.3%之 间，符合相关要求。
总结
本实验在SCIEX液质连用平台上，搭建了一针进样，正负离 子同时采集的Scheduled MRM™ 方法，实现20种激素的同步检 测。实验采用SPE法进行样本前处理，同位素内标校准，对血清 中20种激素进行定量。方法线性良好，加标回收，精密度满足相 关要求。可用于临床实际样本的检测。
