新国标应对—GB 5009.298-2023 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定

百科   2024-09-23 17:00   广东  

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胡金胜 熊亮

引 言

三氯蔗糖,又名蔗糖素,是一种人工合成甜味剂,以蔗糖为原料经氯代而制得,具有高甜度、低热量、安全性高、稳定性好等特点。作为低热量甜味剂或无糖替代品,三氯蔗糖被广泛应用于食品和饮料中,如无糖可乐、乳酸菌饮品、果脯蜜饯、面包饼干、糖果、坚果等。世界卫生组织 (WHO)、美国食品药品监督管理局 (FDA) 和欧洲食品安全局 (EFSA) 等权威机构对三氯蔗糖的安全性进行了评估,并确认其在规定的摄入量范围内是安全的。另外也有研究指出,三氯蔗糖可能会对肠道微生物菌群产生影响,但证据和结论尚不明确;在高温烹饪(如油炸)时,三氯蔗糖会生成少量的氯丙醇类有毒物质。



GB 2760-2024 进一步扩大三氯蔗糖的使用范围和最大使用量


2024 年 2 月 8 日,国家卫生健康委联合市场监管总局发布 47 项新食品安全国家标准和 6 项修改单[1]。时隔十年,《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准 (GB 2760)》迎来再次修订,多种常用食品添加剂调整了使用范围和最大使用量,如脱氢乙酸、三氯蔗糖等。其中在加工坚果与籽类(食品类别 04.05.02)中三氯蔗糖最大使用量为 1.0 g/kg。

2 月 29 日,国家卫生健康委发布《关于石斛原球茎等 23 种“三新食品”的公告》[2],其中提出三氯蔗糖在带壳熟制坚果与籽类(食品类别 04.05.02.01.01)和脱壳熟制坚果与籽类(食品类别 04.05.02.01.02)中扩大使用量,最大限量分别为 4.0 g/kg 和 2.0 g/kg。

表 1 GB 2760-2024 三氯蔗糖允许使用范围以及最大使用量[4](点击查看大图)

表 2 GB 2760-2014 三氯蔗糖允许使用范围以及最大使用量[5](点击查看大图)

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GB 5009.298-2023 新国标变化[6] [7]


2023 年 9 月 6 日,国家卫生健康委、市场监管总局联合印发 2023 年第 6 号公告[3],发布了 85 项食品安全国家标准,其中包含了三氯蔗糖的检测标准—GB 5009.298-2023。

1. GB 5009.298-2023 于 2023-09-06 正式发布,2024-03-06 正式实施;

2. GB 5009.298-2023 代替 GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定;

3. 相较于 GB 22255-2014,GB 5009.298-2023 增加了第二法 高效液相色谱-串联质谱法 (HPLC-MS/MS),修改了第一法 高效液相色谱法 (HPLC-RID&ELSD) 的样品前处理流程、液相色谱条件及方法检出限和定量限。



赛默飞新国标应对方案亮点


1.针对第一法 HPLC-RID,赛默飞实验室采用 Umisil C18 (3) 色谱柱配合最新款示差检测器—VC-D60 进行方法复现,试验结果表明:三氯蔗糖 (0.10 mg/mL) 色谱峰形良好,不对称因子 1.09,柱效优异,理论塔板数 18424;方法灵敏度高,线性低点 (0.02 mg/mL) 信噪比为 83.9;线性范围 0.02-1.00 mg/mL,线性相关系数 r2≥0.9999;方法重现性和稳定性较好,方法检出限和定量限均满足标准要求。流动相须预混脱气后,单通道等度洗脱。

2.针对第一法 HPLC-ELSD,赛默飞实验室采用 Hypersil GOLD C18 色谱柱配合电雾式检测器—CAD 进行方法等效验证,试验结果表明:三氯蔗糖 (10.0 μg/mL) 色谱峰形良好,不对称因子 1.04,柱效优异,理论塔板数 18105;方法灵敏度高,线性低点 (1.00 μg/mL) 信噪比为 99.8;线性范围 1.00-50.0 μg/mL,线性相关系数 r2≥0.9999;方法检出限和定量限均优于标准要求,可替代 ELSD 检测器方法。流动相无须预混,针对复杂基质样品可梯度洗脱。

3. 针对第二法 HPLC-MS/MS,赛默飞实验室采用 Accucore C18 色谱柱配合高灵敏度三重四级杆质谱仪—TSQ Altis 进行方法验证,试验结果表明:三氯蔗糖质谱参数经优化后,保留良好,响应优异;方法灵敏度高,线性低点 (10.0 ng/mL) 信噪比为 206;线性范围 10.0-500 ng/mL,线性相关系数 r2≥0.9999;方法检出限和定量限均优于标准要求,可用于阳性样品的定性分析或低浓度样品的定量分析。



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GB 5009.298-2023 赛默飞应用解决方案


01

第一法 高效液相色谱法

1.1

HPLC-RID Umisil C18 (3), 5 μm, 4.6×250 mm

图 1 Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex-RID (VC-D60) 液相系统

图 2 三氯蔗糖标准品溶液分离谱图及数据 (0.10 mg/mL)

(点击查看大图)

图 3 三氯蔗糖标准品溶液校准曲线叠加谱图 (0.02-1.00 mg/mL)(点击查看大图)

图 4 三氯蔗糖标准品溶液线性最低点 (0.02 mg/mL) 与空白叠加谱图(点击查看大图)

图 5 三氯蔗糖标准品溶液连续进样叠加谱图 (0.05 mg/mL, n=6)(点击查看大图)

图 6 三氯蔗糖标准品溶液与无糖可乐样品溶液叠加谱图

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1.1

HPLC-CAD Hypersil GOLD C18, 5 μm, 4.6×250 mm

图 7 Thermo Scientific™ Vanquish™ Core-CAD 液相系统

图 8 三氯蔗糖标准品溶液分离谱图及数据 (10.0 μg/mL)

(点击查看大图)

图 9 三氯蔗糖标准品溶液校准曲线叠加谱图 (1.00-50.0 μg/mL)(点击查看大图)

图 10 三氯蔗糖标准品溶液线性最低点(1.00 μg/mL)与空白叠加谱图(点击查看大图)

图 11 三氯蔗糖标准品溶液与无糖可乐样品溶液叠加谱图

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图 12 无糖可乐样品溶液连续进样叠加谱图 (n=6)

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02

第二法 高效液相色谱-串联质谱法


HPLC-MS/MS Accucore C18, 2.6 μm, 4.6×100 mm

图 13 Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex-TSQ Altis™ 液相系统

图 14 三氯蔗糖标准品溶液提取离子流图 (100 ng/mL)

(点击查看大图)

图 15 三氯蔗糖标准品溶液校准曲线提取离子流图 (10.0-500 ng/mL)(点击查看大图)

图 16 三氯蔗糖标准品溶液线性最低点 (10.0 ng/mL) 提取离子流图(点击查看大图)

图 17 三氯蔗糖标准品溶液连续进样提取离子流图 (100 ng/mL, n=6)(点击查看大图)

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03

GB 5009.298-2023 相关色谱耗材推荐

第一法 高效液相色谱法

第二法 高效液相色谱-串联质谱法



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参考文献:

[1] 关于发布《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》(GB 2760-2024)等47项食品安全国家标准和6项修改单的公告(2024年 第1号)http://www.nhc.gov.cn/sps/s7891/202403/a51bf4bd1c1545d4bada095735603b6f.shtml

[2] 关于石斛原球茎等23种“三新食品”的公告 http://www.nhc.gov.cn/sps/s7892/202403/7b89108ea0624ffda15a86e3764ee754.shtml

[3] 关于发布《食品安全国家标准 茶叶》(GB 31608-2023)等85项食品安全国家标准和3项修改单的公告(2023年 第6号)http://www.nhc.gov.cn/sps/s7891/202309/799bde70c78d41e79de3567542b9db84.shtml

[4] GB 2760-2024 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准

[5] GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准

[6] GB 5009.298-2023 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定

[7] GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定

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