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这不,这篇由华北理工大学团队发表的研究论文就非常good,该研究以慢性肺部炎症和肺纤维化(PF)治疗为研究方向,通过结合网络药理学和实验验证的创新综合方法揭示白藜芦醇(Res)抗纤维化作用的新机制。该研究思路清晰,逻辑层层递进,且复现极为容易,各位宝子可直接借鉴!这网药+中医药的发文模式真是好处多多啊~
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题目:基于网络药理学方法的白藜芦醇抗纤维化机制解码
杂志:Phytomedicine
影响因子:IF =6.7
发表时间:2024年9月28日
后台回复“666”获取原文献,编号241107
研究背景
吸入结晶二氧化硅(CS)经常导致慢性肺部炎症和肺纤维化(PF),这种疾病的有效治疗方法有限。白藜芦醇(Res)已在PF治疗中显示出潜力。然而其潜在机制仍未完全阐明。本研究旨在通过结合网络药理学和实验验证的创新综合方法揭示Res抗纤维化作用的新机制的首次全面尝试。
研究思路与数据来源
本研究采用网络药理学研究Res的整体药理机制,在药物-靶点-疾病之间构建一个复杂的网络,检查药物与其各自的治疗靶点之间的特定分子相互作用,阐明综合药理学作用机制,然后使用体内和体外研究验证预测的药理作用。
图1. 实验设计流程图
研究结果
1. 构建疾病-靶点-功能注释-信号通路网络
STRING数据库用于对Res治疗PF的216个潜在靶点进行可视化分析,构建PPI网络。该网络的P值富集为<1.0E-16,表明这些潜在目标之间具有高度的互连性和可信度。使用Cytoscape 3.9.1软件对网络节点程度进行拓扑分析,并使用CytoHubba进行关键基因鉴定的进一步分析显示,关键基因(包括AKT1、TNF等)对Res的潜在治疗效果具有重要意义。
图2. Res治疗PF潜在靶点的网络分析结果
2. PF处理中潜在Res靶标的GO/KEGG富集分析
使用GO和KEGG富集分析对Res治疗PF的216个潜在靶点进行分析。GO富集生成2902个GO术语。BP分析突出了重要的过程,例如对外源性刺激、氧化应激和化学应激的反应。CC分析表明膜外围和水泡腔是关键反应位点。MF分析表明 DNA 结合、转录因子结合和蛋白质磷酸酶结合与PF发生有关。KEGG富集分析产生了178个条目,其中前20个条目包括AMPK、IL-17、VEGF信号通路等。
3. 通过分子对接验证Res和治疗靶点之间的结合能力
Res和靶蛋白的结合载量由SwissDock网络服务器预测。采用Sybyl-X 2.0和Dockey软件分析Res的分子对接能力。Res和AMPK之间交互作用的总分和 pKi 的平均值和标准差分别为2.64±0.19和0.2±0.13。此外进行了酶活性测定,结果显示良好的酶活性(图3B),确定了120 μM的最佳ATP浓度。总之酶活性测试结果证实了AMPK和Res之间的相互作用。
图3. 基于TR-FRET的酶活性测试揭示了Res和AMPK之间的相互作用
4. Res对体内PF的影响
如图4B所示,与生理盐水对照组相比,CS暴露组表现出炎症浸润、肺间质水肿和炎性细胞结节的程度。与对照组相比,二氧化硅暴露组的炎症浸润评分显著升高。同时通过Masson染色显示,在CS暴露组小鼠的肺组织中观察到胶原蛋白沉积的显着增加。此外与盐水对照组相比,CS 组肺组织的整体纤维化面积明显增加(图4E)。此外进行免疫组化(IHC)染色检测胶原蛋白 I(Col-I),定量结果显示,CS暴露组的Col-I染色增加。
图4. 体内实验结果分析
5. Res对成纤维细胞转分化的影响
免疫荧光显示,对照组NIH3T3细胞中波形蛋白表现出低荧光信号,CS刺激后波形蛋白的荧光信号强度上调,而Res处理可降低波形蛋白的荧光信号强度。此外Western Blot分析显示,与对照组相比,CS处理组肌成纤维细胞转分化标志物的表达显著增加,而这些蛋白在CS+Res组中的表达降低。相反CC治疗适度逆转了 Res 对肌成纤维细胞转分化的抑制作用。总之,这些结果表明 Res 治疗可以抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化。
图5. 细胞实验验证结果分析
文章总结
本研究通过网络药理学分析确定了Res治疗CS诱导的PF的一套综合治疗靶点。揭示了Res的潜在治疗靶点,为使用Res治疗PF提供了理论基础。读完此篇是真的顺畅,清晰的思路加上优质的选题才是SCI成功的关键!宝子们如果手中也有相关的药物或者数据资源,不妨跟着馆长一起来试试复现此篇吧!犹豫就会败北,速速行动起来吧,馆长等你来哦~
馆长有话说
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