1. 取状态良好的同一个脐带来源和同一批次的间充质干细胞,吸弃培养基,D-hank‘s 缓冲液洗1次;
2. 加入不同品牌的细胞消化酶液体,覆盖细胞即可,室温观察;
3. 待细胞回缩变圆时,加入说明书里面所对应的终止液或缓冲液或培养基;
4. 收集细胞悬液,离心(1700rpm,5min);
5. 弃上清,用完全培养基重悬,计数,按照1:3传代培养;
6. 48小时使用对应消化液消化细胞,Countstar细胞计数仪分析细胞直径数据,根据计数结果来比较消化后增殖能力。
从评测结果来看,A品牌和D品牌的消化酶表现最好,对间充质干细胞的损伤最小,间充质干细胞的增殖生长能力恢复很好。
所以,选择一款合适的细胞消化酶,对间充质干细胞的生长培养有很重要的影响,能很大程度上减少消化酶对细胞的损伤,从而更大程度上确保了干细胞的功能活性。