国自然级别的技术路线图，要根据研究方案的3-4个模块，分成3-4张子图。一一对应。
而每张技术路线图的画法，也有不同类型的区别，主要分为：
（一）以关键技术方法为主线的技术路线图。推荐指数：★★☆☆☆
以实验方法为主线的合理之处在于每种技术所实现的实验目的不同，而且理解了每种技术的原理特点，你会发现实验方法的组合和选择很容易达到。
1.检测蛋白分子的空间分布和表达丰度的技术：免疫荧光、免疫组化、细胞核-细胞质分离结合WB、GFP标签融合蛋白示踪技术、空间蛋白质组学等等；
2.检测某蛋白分子总的表达量（不含空间信息）：ELISA技术（定量）、western blot技术（半定量，不准确）；
分子研究方向
3.检测某蛋白分子的分子量大小（不含空间信息）：分子筛层析法、western blot技术、双向2D电泳、质谱分析等等；
4.检测某蛋白分子的高级结构信息：蛋白结晶后冷冻电镜解析高级结构、分子对接分析等等；
5.检测DNA拷贝数、突变与否的技术：FISH原位杂交、qPCR、基因组测序等等。
6.检测RNA分子在组织和细胞空间分布和表达丰度的技术：活细胞动态RNA成像技术、单分子RNA FISH原位杂交、多分子RNA Scope原位杂交技术、细胞核-细胞质分离结合qPCR、单细胞测序技术、空间转录组技术、Northern blot、dot blot等等；
7.分子表达干预技术：分子克隆操纵表达技术、病毒载体过表达或者敲减表达（shRNA、siRNA）、点突变技术、CRISPR敲除或者敲入技术、CRISPRi沉默技术、功能区分段（truncate）敲除技术、靶蛋白小分子抑制剂或者单抗抑制剂等等；
8.体内水平探索分子功能：类器官、PDX模型、裸鼠皮下成瘤、各种XXX疾病动物模型、基因编辑动物、活体成像技术等；
9.细胞功能探索：细胞增殖、细胞周期检测、细胞衰老、细胞干性、细胞分化、细胞凋亡、细胞焦亡、炎症风暴、迁移、侵袭能力，表面受体表达等等；亚细胞结构的囊泡和细胞器的分离和电镜影像学观察；
10.分子间互作实验方法：RNA、DNA、蛋白之间的互作分析技术如下图；
11.新疾病分子、通路的寻找：蛋白质组学、代谢组学、全转录组测序、生物信息学分析等等；
（二）以科学问题为主线的技术路线图。推荐指数：★★★★☆
以解决10-20个小科学问题为目的的分类方法。优点是把3-4个“拟解决的关键科学问题”，解构成10-20个小科学问题来逐一解决。但相互之间又形成功能单元模块，共同指向并组成同一个“关键的科学问题”。
（三）以研究目标为主线，递进式展开的技术路线图。推荐指数：★★★★★★★★★
（四）以年度研究时间轴为主线的技术路线图。推荐指数：★★★☆☆
优点是能让专家清楚地知道整个研究计划的时间线，评估是否有能力按照规定时间完成实验内容。
缺点是：可能主次不太分明，研究层次被弱化了。
青椒哥还是比较推荐：以研究目标为主线，递进式展开的技术路线图。
另外值得注意的是，技术路线图中一定要包含有以下辅助信息：
实验分组的详情； 研究材料来源和名称； 已完成部分和未完成部分的标注（用颜色色块区分）； 关键实验手段的研究对象；
2024年度国自然医学部50大科研热点中标数统计如下：
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