校对/排版:毕研月
结核感染T细胞检测(体外释放酶联免疫法)
结核分枝杆菌(M.tuberculosis),是引起结核病的病原体。1882年由德国细菌学家郭霍(Robert Koch,1843-1910)发现并证明为人类结核病的病原菌,该菌可侵犯全身各器官,但以引起肺结核最多见。结核病是一种古老的疾病,全球广泛分布,是细菌感染性疾病致死的首位原因。 试剂盒采用体外释放酶联免疫法原理衡量特异性抗原接到的细胞免疫反应强度。通过结核分枝杆菌特异性重组抗原刺激结核分枝杆菌感染者特异性T淋巴细胞并使其增殖、释放IFN-γ。微孔条上预包被的IFN-γ 抗体可与样品中的IFN-γ 结合,再加入酶标试剂进行二次温育。当样品中存在IFN-γ 时,将形成“包被抗体-IFN-γ-酶标抗体“复合物”。复合物上连接的HRP 催化显色剂反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。若样品中无IFN-γ 时,不显色。通过酶标仪检测吸光度(A 值),用校准品浓度值与A 值拟合乘幂曲线,计算样品中IFN-γ 含量,从而判断是否感染结核分枝杆菌。
无内毒素的肝素抗凝真空采血管采集的新鲜全血
可以定量检测人全血经结核分枝杆菌特异性抗原体外刺激后产生的γ-干扰素(IFN-γ)的浓度,从而判断其是否具有针对结核分枝杆菌特异性的T细胞免疫反应,即结核感染T细胞检测。可用于结核感染(潜伏感染或活动性感染)的辅助诊断,其结果不能代替痰涂片、培养或影像学等其他较为经典的结核分枝杆菌感染的诊断方法,亦不作为临床诊断的唯一证据。
要确诊病人是否感染结核及结核发病,还需要同其他诊断方法相结合,如影像血诊断、抗酸涂片、结核培养及分子生物学检测结果。 TB-IGRA反应假阴性的可能原因有:标本的不正确处理如剧烈操作导致细胞受损,受试者本身免疫系统缺陷如接受免疫抑制剂治疗或AIDS,或其他原因。 理论上,每位受试者都能对非特异刺激抗原PHA产生反应。 TB-IGRA反应阳性也可能因罕见的NTM感染引起,如堪萨斯分枝杆菌,海分枝杆菌,斯氏分枝杆菌及转黄分枝杆菌。 对所采集的标本要求较高,需要采集新鲜全血。 随着PPD强度增加,本试剂阳性率由低到高,均呈明显升高趋势,PPD强度与本试剂阳性率呈正相关。
注意事项
本试剂所用标本必须为肝素抗凝的真空采血管采集的新鲜全血,部分采血管内毒素含量较高,可能会引起严重的异常结果,因此,建议使用肝素锂抗凝真空采血管。 所用样品、废液和废弃物都应按传染物处理,终止液为硫酸,使用时注意安全。
备注:本文部分图片来源于网络
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