Thermo变色龙Chromeleon软件操作-数据处理及报告编辑

学术   2025-01-22 07:31   天津  

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一、数据处理
1、进入需要数据处理的样品序列

Chromleon Console 左下侧选择“数据”,在数据导航界面选择样品序列,在右边的工作区显示样品序列中所有样品的信息。

色谱数据处理区(Chromatography Studio)功能区介绍
双击上图序列表中某个数据切换到色谱数据处理区(Chromatography Studio.

进入色谱数据处理区,上部功能区中有剪贴板,导航,预置,窗格四区。在“预置” 区中点击“结果”图标,显示色谱图和结果;点击“校正和处理方法”图标,进入处理方法界面,可对处理方法进行优化和完善;点击“等值图和结果”图标,可对DAD采集的色谱和光谱数据进行处理。点击窗格区中各图示,如等值图,UV-Vis光谱,校准图,可进入该界面。点击“结果”图标,下图显示色谱图和结果表。

2、进入“校准和处理方法”中的“检测”
可执行“Cobra 向导”,直接点击工具栏“数据处理主页”右边的“处理”出现一排彩色图标,分为指针/缩放、检测参数、手动峰检测(积分)、组分表、手 动峰识别等五区,进入检测参数区的“Cobra 向导”和“Smart Peaks”可对检测参数 进行快速和智能的优化。其它区的图标也很直观的显示了许多功能。点击“Cobra 向导”图标进行积分参数优化。

1)、执行“Cobra 向导”快速智能进行积分参数优化
点击“Cobra 向导”,软件会自动进入积分区域-基线噪声范围-Cobra 平滑宽度-最 小峰面积-通道和进样类型进行整个过程的优化。

进入“积分区域”,只要用光标在色谱图上拖出一个积分区域,点击下一步。

进入“基线噪声范围”软件会自动确定基线范围, 直接点击下一步。
进入“Cobra 平滑宽度”在色谱图上点击一个最窄的峰,一般是第一个峰,如果发现 积分标记线有问题,可选中下面的“平滑宽度”,输入合适的值,点击下一步。
进入最小峰面积在色谱图上点击一个面积最小的标准物质的峰,小于这个面积的峰都不积分,最小峰面积设置为所选峰峰面积的 90%。点击下一步
进入通道和进样类型,直接点击完成。
进入通道和进样类型,直接点击完成。
2)、执行“Smartpeaks“向导进一步进行积分优化处理
如果测得的色谱峰之间未达到完全基线分离,尤其是复杂样品的色谱分离图,可 以应用Smartpeaks向导功能,进一步进行积分优化处理。下图中选择(Inpurity)样品并双击。
在上部“检测参数”区,点击“Smartpeaks”向导
中间色谱图区显示的谱图比较复杂,有的峰之间没有达到基线分离。
在色谱图上画框选定并放大要进行处理的色谱区域,如下图所示。
Smartpeaks“向导会自动优化,显示如下五种模式,第三种为谷到谷积分。
选择第三种积分方式,下图中色谱峰显示谷到谷积分方式。

下列功能可用于手动修改。还要注意指针的各种形状:

移动色谱峰定界符(左/右)

移动拆分峰的中间色谱峰定界符

移动基线点(左/右)

移动基线区间

移动基线节点

插入检测参数

添加新组分

移动或编辑检测参数

插入/删除色谱峰

制作肩峰

拆分色谱峰

积分一组 SmartPeaks

当前指针位置无法执行所选功能。


3、组分表的编辑
单击图下“组分表”选项,进入组分表编辑界面,下面分组区表从左到右名称、 保留时间、窗口、通道、评估类型、标准方法、标准类型、级别、浓度单位、因子等列。为了进行校准有必要对这些参数进行设定,选择功能区的“组分表向导” 图标或点击“运行组分表向导”都是进一步进行组分复核,在 Cobra 向导处理方法已包含峰组分的处理。
如点击“运行组分表向导”弹出一小框告知当前的 Cobra 向导处理方法已包含峰组分的处理,选择“更新”作演示。
1)、执行“组分表向导”
进入“时间范围”,使用自动范围,点击下一步。
进入“筛选”,先前软件已处理好,如果不合适,可选中“筛选峰”,输入合适的峰面积,点击下一步。
进入“复核”,在下面组分表中可以输入样品名称,如 A,B,C,(也可在组分表界面输入),点击完成。
2)、优化组分表“分组区”的各表格列
在组分表界面,首先优化分组区的表格列排列,在列名处,右键单击,下拉菜单中点击表格列。
在下图中光标将标准品方法、校准类型、校准级别、浓度单位选中上移,点击确定。
新排列的样品列表中标准品方法、校准类型、校准级别、浓度单位等排在左侧,方便参数设定,下面进行各表格列解释和编辑:

3)、组分表各列的解释和编辑

a、标样峰名称 
在峰名称列中输入标样组分的名字,如 a,b,c。
b、保留时间 保留时间列中各组分的保留时间是根据标准样色谱图中组分自动生成的。
c、保留时间的正负范围窗口

窗口列中是自动生成的保留时间允许的正负范围。在序列样品分析过程中如果保留时间偏移过多,软件会不识别样品中该组分,此时可以适当增大该值的设定。双击窗口列下格,在组分窗口识别框中选最接近的峰的相对值,保留时间正负设定5%,点击“确定”窗宽列下第一行处输入5,点击F9 或者右击,选择向下填充。窗口值会自上而下自动填充。

二、报告格式的编辑修改和打印
1、进入报告格式界面
软件已设定了几个标准的报告格式,在样品序列编辑时已选定好,如果现在要重选报告模式,可以点击左上角的变色龙图标,在弹出框中选中“新建”在右边下拉框中选择“报告模板”。
选择某一标准模板,如“Default DAD”在下图中选择“使用新的报告模板作为序列的默认值”点击完成。
在某一样品序列的色谱数据处理区(Chromatography Studio),点击左下方的“报告设计器”进入结果报告和打印报告界面。功能区中有剪贴板、导航、字体、对齐、数字、单元格、编辑、保护、外部引用等区域。
点击工具栏的“页面布局”,功能区中有预览、页面设置,自动重复、缩放调整、工作表选项、缩放、打印和输出等区域,根据个人需要可进行结果报告的编辑和修改,完全可以制作个性化的结果报告格式。
进入需要打印的界面:类似于Excel电子表格,如上图最下方,分好几页显示,有总览、积分(基本谱图和数据的报告)、校准曲线报告、峰分析报告、总结、审计跟踪和色谱图等选项。
2、总览序列总览,显示序列信息及进样分析时间和完成状态。
3、积分-基本谱图和数据报告

这一页为基本谱图和数据报告,一般需要打印。报告分为三个部分,上部为报告头显示进样信息;中间是色谱图区域;下部是组分结果表。

1)、修改报告的表头 
a在黄色表头区域先删除原表头“色谱图和结果”输入单位名称如上海CDC,选用功能区中“字体”和“对齐区”编辑使达到满意的效果。
b双击右侧带红色的箭头的单元格,可以对显示的参数进行修改,但是不能直接输入会把变量换成常量。而这些都是进样信息,真的有误操作如某样品号的样品重量输错,可在样品序列表中纠正。
2)、谱图区域的优化
双击谱图区域或点击右键在下拉菜单中选择“属性”,弹出“属性”对话框。
可以根据各属性要求一一进行优化
3) “积分结果”表的修改
包括报告列名和报告表行等修改。
a、要改变列名时,可以双击积分结果表中的列名处,弹出属性报告列框,在弹出框中峰结果右边选连接的变量,可以选你所要的如“分离度”。
b表格属性的修改:
在列名处点击右键,弹出下拉菜单包括有表格属性,插入列,删除列等,可以进行表格属性的修改,也可以进行插入列、删除列的修改;
选择“表格属性”可以对积分结果表的行进行修改,在弹出“属性”框中可以对要打印报告的组分峰进行筛选,如在“包含未识别峰”前打勾,那么积分结果表中除了 ABC 组分外还有未知峰信息。通过修改可以得到你所要求的满意的结果报告内容,最后点击色谱工作区左上角的“保存”。
4.峰分析
一个分析方法是否可行要有分离度(Resol.)、对称性(Asym.)、理论塔板数(Plates)、信噪比等指标评定。变色龙软件专门有一页峰分析。
点击图下面“峰分析”选项,在峰结果表中已有峰名称、保留时间、半峰宽、类型、分离度、不对称性、和塔板数列,假如需要加入信噪比,可以点击如“类型”列处, 在弹出的‘属性报告列’框中选“峰结果”右边动态连接的“信噪比”,点击确定,“类型”列立即改为“信噪比”列。

5保存修改后的报告模板
报告模板修改完成后,点击左上角绿色变色龙图标,保存-另存报告模板为,选择保存路径,保存为新的报告模板。
6、指定打印设置
在色谱数据处理区工具栏中点击“页面布局”再双击“打印设置”,
在“打印”框中可以选择打印机、要打印的“工作表名称”及条件。下图左边选择“积分”,右边打印条件下第一行中选择了要打印 “未知样”,每个都打印;第三行选择打印标准,显示有4个标准每个都打印;点击最右边的箭头按钮可以做选择。最后点击“确定”。

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