液相色谱维护及LC-MS关机流程

学术   2025-01-24 07:15   天津  

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一、液相色谱假期前的维护
液相色谱在假期前进行全面维护,能有效延长仪器使用寿命、确保后续实验顺利进行。下面从不同部件详细介绍维护要点:
  1. 色谱柱维护

  • 冲洗:若实验中使用了缓冲盐,先用 20 倍柱体积的低比例有机溶剂 - 水混合溶液(如 5% 甲醇水溶液)冲洗,以去除缓冲盐。之后,再用纯有机溶剂(如甲醇或乙腈)冲洗 10 倍柱体积,置换出水分,防止微生物滋生和固定相损坏。比如,一根 250mm × 4.6mm 规格的 C18 色谱柱,流速设为 1mL/min,5% 甲醇水溶液冲洗时间约 40 分钟,纯有机溶剂冲洗时间约 20 分钟 。

  • 保存:冲洗完成后,将色谱柱从仪器上取下,两端用堵头密封。若长期不使用,应将色谱柱保存在纯甲醇或乙腈中,置于阴凉干燥处,避免阳光直射和高温环境。

  • 流动相系统维护

    • 更换流动相:假期前若流动相已使用较长时间,需更换新鲜的流动相。特别是水相,易滋生微生物,尽量全部处理掉。

    • 清洗储液瓶:将储液瓶取下,先用去离子水冲洗,再用适当的有机溶剂(如甲醇)润洗,最后用去离子水冲洗干净并晾干。对于含有缓冲盐的流动相使用后的储液瓶,更要彻底清洗,防止盐结晶残留。

    • 检查过滤头:流动相过滤头可能会吸附杂质,影响流动相的输送。将过滤头从储液瓶中取出,用稀硝酸浸泡超声清洗 15 分钟,然后用去离子水冲洗干净,重新装回储液瓶。若过滤头污染严重,应及时更换。

  • 泵维护

    • 冲洗泵体:拆下色谱柱,连上两通,用去离子水以 1mL/min 的流速冲洗泵 30 分钟。若泵常使用缓冲盐,可能有结晶,可适当提高冲洗液的温度,但不宜超过40℃,同时增加冲洗时间。再用有机溶剂(如甲醇或乙腈)冲洗20min。

    • 检查密封垫和单向阀:观察泵的密封垫是否有磨损或泄漏迹象,如有问题及时更换。单向阀若有堵塞,可将其拆下,用甲醇或异丙醇超声清洗 15 分钟,安装回原位后检查泵的压力是否稳定,确保单向阀正常工作。

  • 进样器维护

    • 清洗进样针和进样阀:使用进样针专用清洗剂或甲醇多次清洗进样针,去除残留样品。手动进样阀则需用纯甲醇或乙腈冲洗,可通过多次进样清洗液的方式进行。对于自动进样器,要检查样品盘是否清洁,有无残留样品污染。

    • 检查进样器密封:检查进样器的密封情况,确保进样过程中无泄漏。若发现密封不良,及时更换密封部件,保证进样的准确性和重复性。

  • 检测器维护

    • 清洗流通池:不同类型的检测器清洗方法有所差异。如紫外检测器,用甲醇或乙腈以 1mL/min 的流速冲洗流通池 20 分钟,去除池内残留样品和杂质。若有顽固污渍,可使用注射器推入稀硝酸或专用清洗液清洗,但要注意清洗液的浓度和清洗时间,避免损坏流通池。

    • 检查灯的寿命:对于紫外 - 可见检测器的氘灯、荧光检测器的氙灯等,查看灯的使用时长和能量状态。若灯接近使用寿命,应提前准备更换,以免影响后续实验的检测灵敏度。

  • 仪器整体维护

    • 清洁仪器表面:用干净的软布擦拭仪器表面,去除灰尘和污渍。对于顽固污渍,可使用温和的清洁剂,但要避免清洁剂进入仪器内部。

    • 关闭电源和气源(如有):确认仪器各部件维护完成后,关闭液相色谱仪的电源开关。若仪器连接有气源(如氮气、空气等),关闭气源阀门,防止气体泄漏。

    二、LC-MS的关机流程(SCIEX)

    首先,点击standby,仪器进入待机状态,此时液相泵停泵,在Analyst软件的hardware configuration处,将硬件方法灭活。确定好硬件方法灭活,按住质谱侧面黑色“vent”键5秒,机器将会进行放真空,质谱仪正面的真空显示灯快速闪烁,等待20min左右(7-8min左右分子涡轮泵停止,15min左右仪器卸真空完成),真空显示灯会不亮,ready灯会慢速闪烁,此时表示真空已经放好了,可以将质谱侧面power键关掉。把机械泵电源关上。

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