最近收到很多色谱柱超压问题的咨询,确实是个让人头疼的问题,色谱柱一旦压力偏高或已经超过仪器的压力限制,基本上就是报废的节奏,因此,一定要注意色谱柱的使用维护,尽量预防压力升高的问题。
色谱柱超压问题可能由多种原因引起,以下是一些常见的原因及其解决方案:
2. 分析物不溶于流动相时析出沉淀:如果分析物不溶于流动相,可能会析出沉淀,导致色谱柱堵塞。
3. 色谱柱填料塌陷:主要是由于柱内压力突然变化,超过填料所能承受的压力极限。比如,在开启或关闭泵时流速变化太快,或者在高流速下运行时间过长,可能会导致柱头部分填料被压实甚至塌陷,使流动相通过的阻力增大,柱压升高。或者强碱性环境下,填料流失。
4. 柱长和流速的影响:增加柱长可以提高分离度,提高流速可以加快分离,但这些都会导致柱压上升。在选择这些运行参数时,需要综合平衡,选择一个折中的参数。
5. 填料粒径:填料粒径对柱压影响极大,粒径降低一倍,柱压可能增加四倍。例如,在UHPLC中使用的sub-2μm填料,柱压可能超过普通HPLC泵的400Bar上限。
9. 流动相中的非生物颗粒:流动相中的颗粒物也可能导致色谱柱堵塞,引起柱压高问题。
以上解决方案可以帮助预防或解决色谱柱超压的问题,但具体情况可能需要根据实际的色谱系统和色谱柱进行调整。