2023年9月25日,国家卫生健康委发布85项新食品安全国家标准,其中微生物检验方法标准《食品安全国家标准 食品微生物检验乳酸菌检验》(GB 4789.35-2023)将替代GB 4789.35-2016,于2024年3月6日起正式实施。
与GB 4789.35-2016相比,GB 4789.35-2023主要变化如下:
一、乳酸菌定义
旧标准描述了乳酸菌是一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌通称,主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌。
GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
新标准增加了对乳酸菌生化现象的描述:不能液化明胶、不产生吲哚、革兰氏阳性、无运动、无芽孢、触酶阴性、硝酸还原酶阴性及细胞色素氧化酶阴性反应的细菌。
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
二、设备和材料
1、增加样品处理、培养所用的设备和材料:厌氧培养装置(厌氧培养箱、厌氧罐、厌氧袋或能够提供同等厌氧效果的装置)、涡旋混匀仪、恒温水浴锅或金属浴;
2、增加实时荧光PCR法的设备和材料:实时定量PCR仪、离心机、微量移液器和灭菌吸头、PCR管;
3、冰箱温度范围由 2℃~5℃ 改为 2℃~8℃;
4、电子天平感量由0.01g调整为0.001g。
GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
三、培养基和试剂
1、新标准用稀释液代替旧标准的生理盐水。稀释液主要成分为NaCl和胰蛋白胨;
2、修改MRS琼脂培养基和MC琼脂培养基部分成分含量;
3、增加实时荧光PCR法的试剂:DNA提取液、10×PCR缓冲液等。
GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
四、样品制备
1、增加稀释液预热步骤:稀释液在试验前应在 36℃±1℃ 条件下充分预热15min~30min;
2、液体样品处理步骤中,增加拍击式均质器拍打的操作;
3、增加:经特殊技术(如包埋技术)处理的含乳酸菌食品样品应在相应技术/工艺要求下进行有效前处理。
GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
五、培养条件
1、新标准要求倾注的培养基温度在48℃~50℃范围,倾注的量在15mL~20mL范围。旧标准要求倾注的培养基温度为48℃,倾注的量为15mL;
2、新标准根据双歧杆菌、嗜热链球菌、乳杆菌的生长特性,选择36℃±1℃厌氧/需氧培养48h,若菌落无生长或生长较小可选择延长培养至72h。旧标准双歧杆菌、嗜热链球菌、乳杆菌统一选择36℃±1℃厌氧/需氧培养72h±2h。
GB 4789.35-2016《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
六、实时荧光PCR法
旧标准乳酸菌的鉴定(可选做)只有生化鉴定法,新标准增加了实时荧光PCR法鉴定,可鉴定常见的干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌和嗜热链球菌,有较高的准确性和特异性,客户可以根据需求选择适宜的检测方法。
GB 4789.35-2023《食品安全国家标准 食品微生物检验 乳酸菌检验》
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DW-JURAY系列 微生物样品自动重量稀释仪
该仪器可根据稀释比例自动加入稀释液,无需人为计算,自动完成对任意重量样品的准确稀释,使工作简易化;稀释液经过可灭菌分液管路,避免稀释液污染和样品污染。仪器可用于乳酸菌检验中的样本前处理自动稀释。
产品优势
智能计算:无需人工计算,可根据稀释比例自动加入稀释液,提高效率。
灵活运用:仪器仅重6.5kg,支持在实验室随时搬运;可通过触摸面板指令进行编程设置,定制稀释程序,简化仪器操作。
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无菌保证:配合专用无菌均质袋,样品匀液可直接取样分析,无交叉污染。
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该系统可为各类厌氧/微需氧微生物提供“最适所需”的气体培养环境,微需氧最快2min,满足食品安全、乳制品研究、益生菌制品等领域各种微生物培养需求;可应用于益生菌活菌计数、耐氧菌驯化选育、不同氧环境平行条件探究等。
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一机多用:厌氧、微需氧和嗜CO2培养。
快速生成环境:微需氧最快2min,厌氧最快4min。
罐体灵活配置:多种罐体可选,满足不同培养需求。
QA质控软件:培养前5级质控检测,确保重现性100%。
DW-V系列 全自动菌落计数仪
仪器可自动对微生物菌落进行快速读数和统计,提高统计效率,减少人为误差,还可实现对微生物平皿上所有菌落的高通量表型分析,广泛应用于食品、乳制品、饮用水、疾控中心等微生物实验室。
产品优势
平板选择:支持倾注平板、涂布平板、膜滤平板、3M测试片等多种平板。
计数模式:8种自动计数模式,包括较大菌落、中型菌落、微小菌落、灰白菌落、蔓延菌落、多色混杂菌、霉菌等。
数据安全:可设置不同级别操作者的使用权限、数据修改权限,符合HACCP、GLP、GMP等质量体系管理要求。
软件升级:具备偏差统计、全皿测量、杂质剔除、网格清除、颜色分类、人工修正、排除污染、参数换算等。
DW-M80型 自动微生物生化鉴定系统
仪器通过生化反应原理捕获细菌生化表型特征对微生物进行鉴定,可用于GB 4789系列要求的食源性致病菌的分离鉴定和《国家食源性疾病监测工作手册》要求的食源性致病菌的耐药分析,可鉴定550种以上常见微生物,满足乳制品中益生菌鉴定需求。
产品优势
数据库庞大:包括菌种表型信息库2000种以上,可鉴定食源性致病菌和临床致病菌500种以上。
结果可靠:细菌生化鉴定一致性95%以上;药敏实验结果符合率95%以上。
灵活运用:配置智能化鉴定专家系统,自动识别异常细菌表型;一块试剂板可完成鉴定、药敏双试验。
DW-MA6000型 实时荧光定量PCR仪
仪器基于多重荧光探针PCR检测技术原理,可将待检标本核酸与反应液混匀后直接分装加样到多重PCR反应板条中,瞬间离心后即可上机检测,一分钟加样完成最多24种靶标基因检测。
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