论著｜基于5种遗传模型评估亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与非综合征性唇腭裂相关性的meta分析

学术 2025-01-24 17:03 北京

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本文引用格式：霍梦月, 梅花, 张钰恒, 等. 基于5种遗传模型评估亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与非综合征性唇腭裂相关性的meta分析[J]. 中华围产医学杂志, 2024, 27(12): 1024-1034. DOI: 10.3760/cma.j.cn113903-20230725-00046.

霍梦月梅花张钰恒宋丹新春

（内蒙古医科大学附属医院新生儿科，呼和浩特 010050）

基金信息：内蒙古自治区自然科学基金项目（2023QN08027、2020MS08034）；内蒙古自治区科技计划项目（202201291）

摘要

目的评估亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR）A1298C多态性与非综合征性唇腭裂（non-syndromic cleft lip with or without cleft palate，NSCL/P）患病风险的相关性。

方法检索Embase、Web of Science、MEDLINE、PubMed、Cochrane Central Register of Controlled Trials （Central）、护理学全文数据库（CINAHL）、临床试验注册平台（ClinicalTrials.gov），以及中国生物医学文献数据库、维普数据库、中国知网、万方数据库和中华医学期刊全文数据库。中文检索式为“非综合征性唇裂和/或腭裂 OR 唇/腭裂” AND “亚甲基四氢叶酸还原酶 OR 5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶” AND “多态性 OR A1298C OR 1298A>C”，英文检索式为“nonsyndromic cleft lip and/or cleft palate OR nonsyndromic cleft lip with or without palate OR NSCL/P” AND “5，10-methylenetetrahydrofolate reductase OR methylenetetrahydro- folate reductase OR MTHFR” AND “ A1298C OR 1298A>C OR rs1801131 OR polymorphism”。检索建库至2023年2月28日的文献。以NSCL/P患者和对照组为研究对象，收集描述5种遗传模型（等位基因模型、纯合比较模型、杂合比较模型、显性比较模型和隐性比较模型）下MTHFR A1298C多态性与NSCL/P易感性的研究，依据文献纳入及排除标准进行文献筛选和质量评价，采用Review Manager 5.3软件进行meta分析，并根据种族、对照来源和基因分型方法进行亚组分析。

结果共纳入24项符合入选标准的研究，共计8 841例患儿，其中NSCL/P组3 761例，对照组5 080例。在5种遗传模型中，MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险均无相关性（等位基因模型：OR=1.07，95%CI：1.00～1.15，I²=49%，P=0.06；纯合比较模型：OR=1.06，95%CI：0.90～1.26，I²=23%，P=0.48；杂合比较模型：OR=1.05，95%CI：0.95～1.15，I²=59%，P=0.36；显性比较模型：OR=1.04，95%CI：0.95～1.14，I²=58%，P=0.34；隐性比较模型：OR=1.04，95%CI：0.89～1.23，I²=22%，P=0.60）。只有在等位基因遗传模型下，亚洲人群中MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险之间明显相关（OR=1.15，95%CI：1.01～1.31，I²=62%，P=0.04），其余种族及任意遗传模型下，MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险之间均无相关性。在杂合比较遗传模型下，当对照组病例来源于医院时，MTHFR A1298C多态性与人群中NSCL/P发生风险之间存在相关性（OR=1.15，95%CI：1.02～1.30，I²=69%，P=0.03）。无论使用何种基因分型方式，MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险之间均无相关性。所有漏斗图均呈对称性，表明在本次meta分析中不存在明显的发表偏倚。敏感性分析结果显示，没有单项研究会逆转整体研究的结果。

结论MTHFR A1298C多态性与普通人群NSCL/P易感性无关。但在亚洲人中，MTHFR A1298C多态性与NSCL/P风险升高明显相关。

关键词唇裂；腭裂；亚甲基四氢叶酸还原酶；多态性；meta分析

唇腭裂是一种常见的颌面部先天性畸形，总发病率约为1/700^［1］。根据是否伴有其他先天性出生缺陷，唇腭裂可分为综合征性唇腭裂（syndromic cleft lip with or without cleft palate， SCL/P）和非综合征性唇腭裂（non-syndromic cleft lip with or without cleft palate， NSCL/P），其中NSCL/P占所有唇腭裂病例的70%。NSCL/P的病因较多，且不够明确，但目前认为遗传因素在NSCL/P中起主导作用，遗传力为45%～85%^［2］。一些基因参与了NSCL/P的发生过程，如亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase， MTHFR）、转化生长因子-α（transforming growth factor-α， TGF-α）、肌节同源盒1（muscle segment homeobox 1， MSX1）、小泛素样修饰剂（small ubiquitin-like modifier 1， SUMO1）和干扰素调控因子6（interferon regulatory factor 6， IRF-6）等。因此，筛选并定位NSCL/P的易感基因仍是本病病因学研究的重点和难点。

作为NSCL/P易感候选基因的MTHFR基因定位于染色体1p36.3，编码MTHFR，在生物体叶酸代谢过程中起重要作用。叶酸参与细胞的增殖生长，以及氨基酸及蛋白质的合成等过程。叶酸缺乏或代谢障碍会使DNA低甲基化，进而导致多种神经管缺陷，因此MTHFR基因多态性与多种出生缺陷有关。A1298C是MTHFR研究中一个重要的多态位点，在NSCL/P的遗传过程中有重要作用，但目前关于评估MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险间相关性的研究较少，结果也不尽相同^［3］。本研究拟采用meta分析的方法，基于5种遗传模型，全面评估MTHFR A1298C多态性与NSCL/P的相关性。

资料与方法

一文献检索

检索Embase、Web of Science、MEDLINE、PubMed、Cochrane Central Register of Controlled Trials（Central）、护理学全文数据库（CINAHL）、临床试验注册平台（ClinicalTrials.gov）、中国生物医学文献数据库、维普数据库、中国知网、万方数据库和中华医学期刊全文数据库等，搜索时间为从数据库或网站建立到2023年2月28日。中文检索式为“非综合征性唇裂和/或腭裂 OR 唇/腭裂” AND “亚甲基四氢叶酸还原酶 OR 5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶” AND “多态性 OR A1298C OR 1298A> C”，英文检索式为“non-syndromic cleft lip and/or cleft palate OR non-syndromic cleft lip with or without cleft palate OR NSCL/P OR Cleft lip/palate” AND “methylenetetrahydrofolate reductase OR 5，10-methylenetetrahydrofolate reductase OR MTHFR” AND “polymorphism OR A1298C OR 1298A>C”。

二文献纳入和排除标准

1.纳入标准：（1）研究对象：NSCL/P患者（病例）和对照组。（2）研究类型：病例对照研究。（3）内容：描述MTHFR A1298C多态性与NSCL/P相关性的研究，且对照组基因型分布符合Hardy- Weinberg平衡。（4）结果测量的类型：病例组和对照组提供的每个基因型频数完整，且描述本meta分析中至少一个主要或次要结果指标。

2.排除标准：动物研究；非中英文文献；重复出版的文献；无法获取全文、无法提取充分信息或无法进行合并分析的文献。

三资料提取

根据纳入及排除标准，由2名研究人员独立筛选文章并提取数据。若存在意见不统一，则由第3名研究人员确定。从纳入的文献中提取以下信息。（1）文献基本特征（作者、年份、国家）。（2）研究对象（对照来源、DNA来源、基因分型方法、病例和对照组的样本量）。（3）主要结果（每个基因型的频率）。

四质量评估

纳入文献质量评估采用纽卡斯尔-渥太华量表（Newcastle-Ottawa Scale， NOS），主要包括研究人群选择（0～4分）、组间可比性（0～2分）和暴露因素测量（0～3分）等3个方面。NOS满分为9分，总分0～4分为低质量，5～6分为中等质量，≥7分为高质量^［4］。

五统计学分析

使用Review Manager 5.3进行meta分析。首先对所纳入的文献进行异质性检验。当I²≤50%且P≥0.1时，表示各文献间不存在异质性，使用固定效应模型分析；反之表示纳入文献间存在异质性，需通过亚组分析进一步分析异质性的来源。在尽可能排除异质性影响后，采用随机效应模型分析。遗传多态性分析包括5种遗传模型：等位基因模型、纯合比较模型、杂合比较模型、显性比较模型和隐性比较模型，记录各种模型的OR值和95%CI。P<0.05为差异有统计学意义。对纳入研究的对照组基因型进行Hardy-Weinberg平衡检验，P>0.05为遵循Hardy-Weinberg平衡定律。最后通过逐项剔除纳入文献的方法观察剔除研究对总合并效应量的影响，以进行敏感性分析。

结果

一纳入文献的质量及基本信息

检索获得文献239篇，根据纳入和排除标准，最终24篇文献^［5-28］进入本次meta分析，均为中高质量文献，包括8 841例研究对象，其中NSCL/P组3 761例，对照组5 080例。纳入文献的基本信息和NOS得分见表1，文献筛选流程见图1。

表1 纳入文献的一般特征

注：PCR：聚合酶链反应（polymerase chain reaction）；RFLP：限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism）；ARMS：扩增阻滞变异系统（amplification refractory mutation system）；NSCL/P：非综合征性唇腭裂（non-syndromic cleft lip with or without cleft palate）；NOS：纽卡斯尔-渥太华量表（Newcastle-Ottawa Scale）

图1 本研究纳入文献筛选流程图

二 meta分析结果

在5种遗传模型中，MTHFR A1298C多态性与NSCL/P发生风险均无相关性（等位基因模型：OR=1.07，95%CI：1.00～1.15，I²=49%，P=0.06；纯合比较模型：OR=1.06，95%CI：0.90～1.26，I²=23%，P=0.48；杂合比较模型：OR=1.05，95%CI：0.95～1.15，I²=59%，P=0.36；显性比较模型：OR=1.04，95%CI：0.95～ 1.14，I²=58%，P=0.34；隐性比较模型：OR=1.04，95%CI：0.89～1.23，I²=22%，P=0.60）。见图2~6。

图2 亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与非综合征性唇腭裂发生风险间相关性的等位基因模型森林图　可见在该遗传模型中，亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与非综合征性唇腭裂发生风险无相关性