细胞染色五大"门派"看谁是你心中的出片高手

学术   2024-12-09 09:51   天津  

五种细胞染色方法及特点

染色方法

染色特点及应用范围

简单染色法常用碱性染料如美蓝等进行简单染色

革兰氏染色法

一种重要的细菌鉴别染色法,经染色后,阳性菌呈紫色,阴性菌呈红色,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,从而用以分类鉴定。

瑞氏染色法

瑞氏试剂中酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后,变成中性的伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞中的NH3+和COO-等结合,使细胞核胞浆着色。由于系中性染料,又有缓冲液调节酸碱度,所以细胞受染后,蓝红等颜色都较适中,核染质、胞浆以及其中颗粒显色较为清楚。

姬姆萨染色法

病理学以及疾病研究中常用的染色剂。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。但该法对细胞核寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而细胞质和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长,可用复合染色法。

免疫组化染色法

利用抗原抗体之间的特异性结合,用于研究细胞产物如分子、蛋白质或糖蛋白的表达、定位、分布和迁移等。


十三种细胞染色试剂


1、酸性品红(Acid fuchsin)

酸性染料,呈红色粉末状,能容於水,略溶于酒精(0.3%)。是良好的细胞制染色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。它跟甲基绿同染,能显示线粒体。组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度,易在自来水中褪色。


2、 刚果红(Congo red)

酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水和酒精,遇酸呈蓝色。它能作染料,也用作指示剂。它在植物制片中常作为苏木精其他细胞染料的衬垫剂。用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木精作二重染色,也可用作类淀粉染色,能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速


3、甲基蓝(Methyl blue)

弱酸性染料,能溶於水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。跟伊红合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易氧化,因此用它染色后不能长久保存


4、固绿(Fast green)

酸性染料,能溶于水(溶解度为4%)和酒精(溶解度为9%)。固绿是一种染含有浆质的纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。它和苏木精、番红并列为植物组织学上三中最常用的染料。


5.苯胺蓝(Aniline blue)

混合酸性染料,平常所用很难有一定的标准。此染料一般很难溶於水,也不易溶於酒精(1.5%)。植物制片中可与番红合用,作为组织染色;也可作藻类植物染色。因为这种染料的成分很不一致,染色效果不易掌握。


6、苏丹Ⅲ (Sudan Ⅲ)

弱酸性染料,不溶解於水,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为0.15%)。常用70%酒精中的饱和溶液。苏丹Ⅲ是脂肪染色剂


7、苏丹Ⅳ (Sudan Ⅳ)

弱酸性染料,也是很好的染脂肪染料,现在多用以代替苏丹Ⅲ,可染树脂、乳汁管、蜡质以及角质等结构,也可使叶绿体染成暗红色


8、伊红(Eosin)

常用的伊红Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15摄氏度是溶解度达44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为2%)。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂


9、碱性品(复)红(Basic fuchsin)

碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度1%)和酒精(溶解度8%)。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻轮藻的整体染色。在细菌学制片中,常用来鉴别结核杆菌


10、 结晶紫(Crystal violet)

碱性染料,能溶于水(溶解度9%)和酒精(溶解度8.75%)。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。它是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久储存


11、 中性红(Neutral red)

弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度4%)和酒精(溶解度1.8%)。它的碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液,用作显示尼尔体的常用染料。


12、番红(Safranin)

碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织常用的染料,能染细胞核染色体和植物蛋白质示维管束植物木质化木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊


13、甲基绿(methyl green)

碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度8%)和酒精(溶解度3%)。甲基绿是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。


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