很多Western Blot实验室因为设备已经使用多年,常会发现垂直电泳槽的制胶器没有原来好用了,经常会有“漏胶”或者“漏液”的现象,也就是说,凝胶溶液还没有来得及凝固,就从玻璃板某个周围的某个缝隙“漏”出去了。
最糟糕的情况莫过于,漏液速度没那么快,刚加好溶液时看不出来有漏胶或者漏液,而等了半小时凝胶凝固之后才发现,玻璃板之间的凝胶已经偷偷地漏了一节下去,导致需要重新制胶。
用市面比较常见的制胶模具设计举例,在下图中可以看到,玻璃板中间盛装凝胶溶液,玻璃板两侧靠夹子夹紧玻璃板和边条压片,下方用一个较厚的橡胶垫做密封,这样就组成了一个单侧上开口的三明治夹形状。
如果密封的好,凝胶溶液就会凝固成与边条压片厚度一致的凝胶用来做后续的蛋白质电泳。
那么哪些地方可能会导致漏胶或者漏液这种问题呢?
1. 玻璃板侧方或下方不小心因磕碰受损,这样玻璃板受损处则不再平整,液体会从这些部位漏出。这种情况下只能更换玻璃板,而很多垂直槽的玻璃板和边条压片是粘在一起的,这种情况则需要一起更换。
有时由于清洗不到位,边条压片表面会有污物凸起,也会导致两侧不能密闭夹紧而漏胶。
2. 两侧的夹扣变松,或有些厂家的夹扣为了防止漏液,设计的很紧,时间长之后,玻璃板被挤压变形,密封性下降。这样玻璃板也会从两侧漏胶。
3. 底座的胶垫老化、变形或错位,玻璃板底部会发生漏胶。
4. 桌面不平整,玻璃板上夹具时不容易放正,玻璃板安装到夹具上时是相对于底座橡胶垫倾斜的,这样玻璃板底部会发生漏胶。
此外还可以尝试以下方法解决漏液:
• 重新安装胶板,确保内槽不漏液后再开始电泳。
• 检查并更换老化的密封条。
• 清洁电泳槽内槽,确保无杂质影响密封。
• 检查电泳槽是否有物理损伤,并进行必要的更换或修复。
如果问题依然无法解决,需要考虑更换电泳槽。