细胞培养是一项精细且技术性很强的工作，涉及到细胞的生长、繁殖、传代以及冻存等多个环节。每个环节都需要精心操作，以确保细胞的健康和实验的准确性。今天小曼将为大家讲述细胞从复苏到传代再到冻存的流程中，一些可能被忽略但非常重要的细节。
1细胞培养基如何选择？
如果购买的细胞是买自ATCC或者其他的细胞库，直接问供应商或者查找相关文献；培养基的种类的话，基本上最常用的有四个--MEM、DMEM、1640、F-12。具体可以参考之前的公众号文章养细胞必看！常见细胞株及对应培养基，细胞培养小知识-常用培养基有哪些？如何配制？。
2 细胞培养基为什么是红色的？
细胞培养皿：通常为扁平的圆形或方形容器，有多种尺寸，如6孔、12孔、24孔、96孔等，适合进行小规模的细胞培养或实验。操作比较方便，成本较低。
细胞培养瓶：通常是圆柱形的容器，容量较大，如25cm²、75cm²、150cm²等，适合培养更多的细胞或进行长期培养。安全系数更高，成本相对较高。
细胞培养状态上两者差不多，一般没有啥特殊要求，选择培养皿就可以。
细胞冻存对细胞量的要求通常较高，以确保在复苏时有足够的细胞存活。根据搜索结果，细胞冻存时，细胞密度应达到≥90%，并且在冻存管中细胞的起始浓度建议为106−107个/ml/管/ml/管。这意味着在进行冻存之前，细胞应该在培养皿或培养瓶中生长到接近或达到这个密度，以保证在冻存和复苏过程中有足够的细胞数量，减少因细胞死亡导致的损失。
此外，冻存液的配置也非常重要，通常包含基础培养基、血清和保护剂（如DMSO），比例可以根据细胞类型和实验习惯进行调整，但常见的配方是培养基：血清：DMSO = 7:2:1 或其他比例。高浓度的血清有助于维护细胞活力，提高复苏后的存活率。在冻存过程中，还应注意慢冻原则，避免细胞内形成冰晶，减少细胞损伤。
希望这些细胞培养的小知识能够帮助你解决实验中遇到的问题。如果你觉得这篇文章有用，别忘了点击右上角分享给需要的朋友们，或者点击收藏，方便日后查阅。如果有细胞培养方面的问题可以一起讨论，让我们一起探索细胞培养的奥秘！"
