来源:涵庄检验视界
污染是检验科日常工作中遇到的常见问题,因其不易识别,也往往成为影响临床检验质量的重要原因。出现前提前预防,发生后及时处理,成为临床实验室规避污染的重要手段。
实用的预防措施包括监测污染、确定净化策略以及选择有针对性设计的设备以减少污染的可能。许多临床实验室配置了自动化流水线(TLA),并通过在制造商的检测平台中内置物理和化学预防措施来确保样品结果的准确性。具体来说,一些TLA系统包括液压门和带有HEPA过滤器的气闸网,可在测试系统本身内实现“洁净室”环境。
从国外的情况来看,制造商提供的另外两个物理解决方案是不同的移液系统和包含扩增产物的板的自动封闭。此外,许多TLA系统中的智能液体处理控制是一种额外的制造设计,可防止污染。这项智能技术根据被吸液分液的特性控制和监控吸液分液速度,从而最大限度地减少装满的移液器吸头悬停在打开的样品管上或系统内的样品停放区域的时间。对于常规血液、生化、免疫检测系统来说,携带污染是必须要重视的问题,很多制造商制定了相应的评估程序并将其体现在说明书当中。如果实验室对使用自动化设备处理的样品进行分子检测,则实验室应进行风险评估,包括残留评估或对已发表文献的评估,以了解使用自动化设备对下游样品的污染风险。除了物理污染屏障外,一些制造商还加入了化学屏障,例如每个反应中都加入了AmpErase 酶,从而降低了残留的可能性。反应混合物中存在这种酶,通过区分扩增产物和靶分子,并且无需使用漂白剂进行净化,从而降低了残留污染导致假阳性结果的风险。
保持实验室空间清洁和正确使用防护装备同样重要。使用个人防护设备、手套、实验室外套、面罩(适当时穿靴子和面罩)有助于保护工作人员和标本免受污染。锐器容器、防溅罩以及随时可用的洗手池,都是限制污染物传播的良好做法。合理使用生物安全柜也很有帮助,对于临床微生物学样本尤其重要。同样的,良好的临床实验室管理对于污染的预防意义也很重要。实验室开展六西格玛5S活动,整理实验室空间和表面使它们更容易清洁,并支持更有序的工作流程,也对于污染的预防颇有益处。花时间进行风险评估并观察工作人员执行常规临床工作流程,尤其是在人员短缺和检测量高的时期,同样可以收到事半功倍的效果。发现风险时,及时明确的语言提醒被证明是非常有效的,可以给人留下深刻印象。
解决污染问题可能极具挑战性,而且成本高昂。这就是为什么预防和早期识别是关键。从大体来说,解决的核心原则对于临床实验室与建筑行业其实没什么两样。按照成本和工作量的顺序(从低到高),这些是去除、封装、封闭,在最坏的情况下是拆除。几乎所有的临床实验室污染事件都可以在“去除”阶段解决,即通过彻底的清洁和处理受影响的耗材。适当的清洁方法根据污染物和污染发生的部位而有所不同。
例如稀释的漂白剂溶液可能适用于与PCR相关的表面清洁,但它们在消除与脂溶性标准品溢出相关的污染方面效果不佳。实验室应制定清洁程序,以解决清洁不同类型的实验室表面和设备的问题,包括计算机键盘和电话等高频接触表面。对于仪器仪表,应注意制造商推荐的特定清洁产品和工艺。此外,临床实验室可以使用参考文件和指南来制定有关生物安全和预防的策略。需要指出,美国CLSI发布了M29文件,其中包括管理污染事件的指南,包括实验室设备的清洁策略、环境净化和发生重大污染事件时的紧急暴露管理。
一位资深临床实验室主任在谈到污染处理这个问题时,以自己实验室的快速分子SARS-CoV-2/流感/RSV检测的阳性污染处理为例,指出清洁、运行阴性QC,重复检测,这三个步骤完全可以解决。他指出,除了增加制造商推荐的清洁频率和对生物安全柜和超净工作台的清洁外,实验室还对多个表面进行了环境拭子检测,并对于生物安全柜的工作托盘、椅子、键盘等都进行了清洁,直到任何阳性结果均为阴性。强调专门用于去除核酸的键盘套和清洁产品可能会有用。他也坦言,解决污染最棘手的部分与首先识别污染有关,尤其对于偶发或者低水平的污染。这没有统一的完美答案,需要每个实验室持之以恒的探索。
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