克隆构建(也称为载体构建),即DNA的体外重组,是分子克隆技术的核心部分之一,通过特定的酶促反应,将外源DNA片段与基因工程载体DNA连接起来形成重组载体。常用的克隆构建方法包括T4连接酶连接、TOPO连接、同源重组、Golden gate等方法,其实这些方式都只是连接方法,无法避免前期载体酶切、纯化等繁琐的操作,以及连接效率高低不一的问题。
为解决克隆构建前期准备工作复杂、成功率低等问题,达领生物推出了全新的系列产品——克隆构建试剂盒,满足原核表达、真核表达、酵母双杂等各类应用场景,该产品包含经标准化工艺制备的高质量线性化载体,提供已优化验证的同源序列,使用该产品无需进行载体线性化、载体纯化、同源臂设计与片段酶切,仅需一步即可将目的片段定向无缝克隆至相应的载体上,大幅简化了实验操作,提高了实验成功率。1. 经客户李老师实测,对pET-28a克隆构建试剂盒评价为:与市售口碑良好的N公司产品对比,达领pET-28a克隆构建试剂盒的连接效率更高,操作更便捷,省时省力。
2. 经客户程老师实测,对pcDNA3.1克隆构建试剂盒评价为:连接效率高,反应产物取5 μL于50 μL感受态即可获得较多克隆菌落,挑单个菌斑送测,测序结果Blast后序列比对正确,符合预期,产品阳性率高。
3. 经本公司系统测试,对不同物种的约1 kb、3 kb与5 kb目的片段进行连接,结果显示达领pcDNA3.1克隆构建试剂盒面对不同来源与长度的目的片段均表现优异。
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