都是蛋白凝集惹的祸

学术   2024-12-08 12:09   重庆  

作者 | 范琳,李韵青

单位 | 青岛市第三人民医院




前言


输血是临床上疾病救治的重要手段,输血前必须进行血型鉴定、抗体筛查和交叉配血试验。


当遇上血型正反定不相符、抗体筛查试验阳性、交叉配血试验不相符[1]时,我们该如何应对呢?这背后相关的疾病与实验室相关检查又有哪些呢?



案例经过


患者,女,55岁,因“子宫腺肌病、子宫肌瘤、异常子宫出血、重度贫血”入院,拟择期手术治疗,行术前备血。抗体筛查I、II、III谱细胞均阳性,格局基本一致如图1,血型鉴定结果如表1,其它检查结果如图2和图3:


图1  抗体筛查试验结果


表1  血型鉴定结果


图2  血常规结果


图3 传染病筛查结果


抗筛格局基本一致,考虑假阳性可能,患者TRUST阳性,难道也是受到了干扰?随即与临床沟通,患者自述发现,贫血10年,子宫腺肌病5年,无传染病史,无婚外性接触史。为患者加做coombs实验,结果如图4:


图4  直接抗球蛋白试验结果


考虑患者红细胞和血浆均存在干扰可能性,随即取一袋O型血进行交叉配血试验:


1.凝聚胺法主侧和次侧相合。


2.盐水介质法:主侧次侧均有凝集,并随时间延长凝集强度变强,如图5:


图5 10×40高倍镜


每管加2滴生理盐水,混匀后离心,镜检凝集基本消失,如图6:


图6  10×40高倍镜


3.微柱凝胶卡结果如图7:主侧±,次侧2+(凝集强度明显弱于coombs试验)。


图7 直接抗球蛋白试验及交叉配血试验结果


抗筛格局基本一致,要除外蛋白凝集可能。异常的蛋白凝集增多是因为患者血浆中含有过量的球蛋白或纤维蛋白原,使红细胞出现假性聚集,镜下多为缗钱状排列。


蛋白凝集并非是抗原抗体特异性结合,借助生理盐水替换能很好地消除异常蛋白产生的影响[2-6]。处理方法如下:患者血浆与谱细胞混匀,37℃孵育15分钟,离心弃上清液,加等量生理盐水,混匀,加入抗人球蛋白卡,离心,结果阴性。


血型鉴定可通过盐水置换得出阴性结论,抗筛也得出阴性结论。进行盐水介质法交叉配血时,借助生理盐水替换法也得以解决。


但因类似病例之前未遇到,与临床医生沟通,目前患者非常平稳,建议先补充铁剂,送血站进一步鉴定,并建议患者进一步进行TPPA,自身抗体,抗磷脂抗体等相关实验室检查[7],进行病因查找,临床医生均予以同意。血站检查结果如图8:


图8  血型鉴定、直接抗球蛋白、抗体筛查结果


检验科其它检查结果如图9-11:


图9  梅毒特异性抗体结果


图10  抗核抗体结果


图11  抗磷脂抗体结果



案例分析


以上结果提示,患者抗磷脂抗体综合征可能性大。为什么该患者会出现TRUST和TPPA结果不一致呢?


这和梅毒的免疫性有关,TURST检测为非特异性抗心磷脂抗体,所用抗原为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混合物。


很多临床资料标明,此类试验容易受自身免疫疾病(如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮)、恶性肿瘤、老年人、孕妇等,所以不宜用来诊断,但其可以用来判断是否是现症感染及监测治疗效果。


TPPA为梅毒特异性抗体,一旦感染梅毒后,不管治愈与否,梅毒特异性IgG抗体可通过记忆细胞持续产生,大概率会终生阳性,所以没法单独通过特异性抗体来判断其是否是现症感染及治疗效果。


患者TRUST原倍强阳性,稀释滴度仅为1:4阳性。研究表明,非特异性抗体假阳性滴度一般在1:8以下。患者抗心磷脂抗体阳性,TPPA阴性,为抗心磷脂抗体导致假阳性。


对于蛋白凝集的患者,不能用卡式法进行交叉配血。采用试管法并进行生理盐水置换后,镜下凝集基本消失[8],为患者发放4U去白细胞悬浮红细胞,输血后24小时进行血常规检测,结果如图12:


图12  血常规结果


当日又输注4U单位去白细胞悬浮红细胞,次日复查血常规如图13:


图13  血常规结果


输血后,患者血红蛋白明显提升,输血疗效满意,无输血不良反应。临床医生在腹腔镜下为患者施行全子宫切除术、双侧附件切除术,手术顺利,术中未输血。两个月后患者来复查,血常规结果如图14:


图14  血常规结果



案例总结


每一名检验人员都应该像一名侦察兵一样,眼观六路耳闻八方。一项异常结果的背后,往往隐藏着某种疾病。随着检验自动化不断提升,遇到异常标本,手工加镜检,依然不能少。


无论是从事检验或是输血工作,都需要对实验原理,检验报告的临床意义,假阴性或者假阳性的识别以及处理办法做到耳熟能详,才能更好的服务于临床。






参考文献

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[1].贾彩虹,刘培贤,李小丽.交叉配血不合原因分析及输血[J].山西职工医学院学报,2013,23(1):17-19.

[2].郑皆炜,刘曦,沈伟,等.血清学检测中蛋白凝集现象的鉴定及特征分析[J].中国输血杂志,2017,30(12):1385-1386.

[3].吕晓华.异常蛋白凝集干扰交叉配血提示确诊1例多发性骨髓瘤[J].临床输血与检验,2020,22(04):443-445.

[4].彭元洪,青玉凤,钟晓武,等.以手指肿痛为首发表现的多发性骨髓瘤误诊报告[J].临床误诊误治,2016,29(8):42-44.

[5].Derganc J,Antonny B,Copic A.Membrane bending:the power of protein imbalance[J].Trends in Biochemical Sciences,2013,38(11):576-584.

[6].Svetina S,Ziherl P.Morphology of small aggregates of red blood cells[J].Bioelectro Chemistry,2008,73(2):84-91.

[7].黄学东,杨翠丽,候晓芹,等.自身抗体对甲苯胺红不加热血清试验检测结果的影响分析[J].四川医学,2021,42(09):892-896.

[8].中华人民共和国卫生部临床输血技术规范.〔2000〕.卫医发字第184号.




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编辑:李玲     审校:陈雪礼


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