作者 | 朱妙珊
单位 | 惠州市惠阳区妇幼保健院
放线菌属为革兰阳性无芽孢杆菌，广泛存在于土壤、植物、空气及江河湖泊等自然环境中，是存在于人体口腔、消化道、生殖道的正常菌群[1]。
放线菌可引起面颈部、胸部、腹部、盆腔和中枢神经系统等感染，表现为多发性脓肿、窦道、硫磺颗粒分泌物，放线菌感染病例通常会合并其它细菌的感染。
路邓葡萄球菌为凝固酶阴性革兰阳性球菌，主要引起皮肤软组织感染[2]。
本文报道1例腹腔镜术后切口纽氏放线菌合并路邓葡萄球菌感染病例。
患者女，42岁，2020年9月3日行腹腔镜下左侧卵巢囊肿剥除术+右侧输卵管系膜囊肿摘除术+右侧卵巢剖视术”，术后1月余开始出现脐部术后切口疼痛，稍红肿伴瘙痒，有少量黄白色恶臭味液体渗出；
彩超示：脐部低回声区，范围约23×19mm，疑炎性改变，予切开引流治疗后好转。
2021年初患者再次出现脐部疼痛、红肿伴瘙痒，无渗液、发热等不适，予药物贴敷治疗后好转。
2024年05月19日又再次出现脐部疼痛、红肿伴瘙痒，来我院就诊,查彩超示：脐下方异常声像，皮下软组织内可探及三个稍低回声团，大小分别约9x15mm、9x11mm、5x6mm，疑炎性包块。门诊建议住院进一步治疗，患者未予采纳。
2024年5月23日，患者自行予“平安膏”涂抹脐部后出现脐部脓液大量渗出，呈黄白色颗粒样，味臭，疼痛较前缓解，仍有红肿、瘙痒等不适，脐部下方可触及一个肿物，表皮破溃，大小约0.9cm×1.5cm，边界清，挤压可见少量黄白色颗粒样分泌物渗出。遂入院行腰硬联合麻下腹壁病损切除术，切口分泌物送检细菌培养。
送检的切口分泌物为黄白色颗粒样，在5%C02 条件下，35℃培养24小时见针尖样菌落生长至第二区，同时在第一区伴有淡黄色不溶血的菌落生长，分别对两种细菌进行分纯培养，通过珠海美华质谱仪鉴定分别为纽氏放线菌，分值2.1（见图1）、路邓葡萄球菌，分值1.9（见图2）。
图1 纽氏放线菌质谱鉴定结果
图2 路邓葡萄球菌质谱鉴定结果
纽氏放线菌经分纯后在35℃，5% CO2条件下培养48小时，为灰白色圆形凸起菌落，无溶血环（见图3），涂片经革兰染色镜检为革兰阳性杆菌（见图4）。
图3 纽氏放线菌35℃血平板培养48h菌落形态
图4 纽氏放线菌革兰染色结果（10x100）
另一株葡萄球菌经迪尔DL-96A细菌鉴定系统鉴定为路邓葡萄球菌，纽氏放线菌经北京睿博兴科生物技术有限公司靶向DNA 测序，结果为Winkia neuii(NR042429.1)99.929%（见图5）。
图5 纽氏放线菌靶向DNA测序结果
根据路邓葡萄球菌药敏结果（见图6）：对青霉素耐药，对头孢西丁、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、红霉素、左氧氟沙星、庆大霉素、四环素、复方新诺明、万古霉素、利奈唑胺均敏感。
因本实验室使用的鉴定药敏系统无放线菌属的，无法开展放线菌的药敏试验，临床结合路邓葡萄球菌的药敏结果与 《热病——桑福德抗微生物治疗指南》 ，推荐放线菌的治疗方案（见图7）；
临床选择静脉滴注克林霉素0.3g q8h 治疗一周后，复查切口分泌物细菌培养为无致病菌生长，出院后随访两个月，患者切口恢复良好，无异常。
图6 细菌鉴定及药敏结果
图7 《热病——桑福德抗微生物治疗指南》中的放线菌属治疗推荐方案
临床外科手术切口感染的病原菌主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌最为常见[5][6]，而由纽氏放线菌合并路邓葡萄球菌感染的病例非常罕见。
纽氏放线菌是一种棒状的革兰氏阳性菌，于上世纪90年代早期被人们鉴别发现，该病菌主要与浅表软组织感染、脓肿及术后感染相关；
路邓葡萄球菌为凝固酶阴性葡萄球菌，以首次分离该菌的法国城市里昂的拉丁名lugdun命名，凝固酶试验用玻片法常鉴定为阳性。
可引起医院获得性感染与社区获得性感染，如皮肤软组织感染、肺炎、脑膜炎、血流感染与心内膜炎，此菌对青霉素的耐药率较高，对临床大部分抗菌药物较敏感。
此外，路邓葡萄球菌可产生路邓菌素，在体外能杀死金黄色葡萄球菌，故其在鼻腔内的存在与金黄色葡萄球菌的鼻腔定植呈负相关，故此菌也作为一种益生菌而进行开发，用于防止或根除金黄色葡萄球菌定植。
近年来，随着质谱技术的应用，在临床分离出许多新型的放线菌种类[3][4]。本例患者在腹腔镜术后切口反复感染，黄白色颗粒样脓液有臭味，应引起高度重视。
综上所述，放线菌感染引起腹腔镜术后切口感染，脓液细菌培养有助于疾病的确诊，由于某些医疗机构的细菌培养和鉴定条件的限制,有可能会造成放线菌漏诊情况,影响临床治疗效果造成切口反复感染，由此可见质谱鉴定在临床上发挥着重要的作用。
点评专家：王健 副主任技师 惠州市惠阳区妇幼保健院检验科
对于一些罕见菌株，依靠传统的鉴定方法很难明确病原菌，质谱技术检验获取结果的时间比传统方法更短，从而快速鉴定出细菌的种属。
本病例中的纽氏放线菌通过质谱技术快速鉴定出来，根据放线菌的经验治疗方案指导临床应用抗生素治疗，可见质谱鉴定技术大大提高了微生物实验室的工作效率与准确性，对于患者后续治疗方案的合理制定具有良好的促进意义。
参考文献
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编辑：李玲 审校：陈雪礼
