图解病理染色｜第7期. 免疫组织化学染色的详细流程，一篇搞定！
文摘
科学
2024-07-10 19:42
北京
上期我们介绍了免疫荧光染色，采用荧光素标记物对细胞或组织中的抗原进行定位和定量，本期我们介绍另一种应用广泛的方法即免疫组织化学染色法，通过酶标记物对特定抗原进行定位和定量。
免疫组化具有特异性强、敏感性高、定位准确、形态与功能相结合等多种优点，可应用于确定细胞类型、发现微小转移灶、了解分化程度、肿瘤起源与分化 、指导治疗与预后等多个方面。
本期我们将详细介绍组织石蜡切片免疫组织化学染色的原理、实验步骤和图解示例等内容。
原理：免疫学抗原和抗体特异性结合和化学显色原理
通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。
结果可信的免疫组化染色必须设立对照实验。
阳性对照：判断试剂和操作是否有问题
阴性对照：判断染色特异性，区分目的信号和背景，一抗用PBS代替。
染色特点：通过颜色来显示蛋白质的有无、定位（胞外、胞膜、胞浆、胞核）、含量变化。
数据分析：主要有两种方法，阳性着色细胞计数法和染色强度评分法。前者是在光学显微镜下，随机多个视野下计数阳性着色细胞；后者则是按染色强度和染色阳性范围评分，最终分数相加。通过Image J软件测量，Graphad Prism作图。具体方法可以参考B站“开心doctor”视频介绍临床医生科研作图—13.1HC图片拼接、数据转 化、统计作图
图中展示了不同组肾组织中Ly6G+中性粒细胞和F4/80+巨噬细胞的浸润。
原文图注：a. Infiltration of Ly6G+ neutrophil and F4/80+ macrophages in different groups of renal tissues
原文描述：The IHC staining targeting Ly6G and F4/80 showed that CCL28 or CD25 antibody administration significantly increased the numbers of neutrophils and macrophages in Alkbh5fl/flKspCre mice compared to those without CCL28 or CD25 antibody administration (Fig. 7a).
这就是本期的全部内容啦！不知道这样的展示方式是否能帮助到你？也特别欢迎大家给我们多多留言，希望我们能一起成长，共同进步！下一期介绍油红染色的具体步骤和图解分析，敬请期待！参考文献：Chen, J., Xu, C., Yang, K. et al. Inhibition of ALKBH5 attenuates I/R-induced renal injury in male mice by promoting Ccl28 m6A modification and increasing Treg recruitment. Nat Commun 14, 1161 (2023).原文链接：https://doi.org/10.1038/s41467-023-36747-yhttps://www.bilibili.com/video/BV1SP411F7wt/?spm_id_from=333.337.search-card.all.click&vd_source=26632440e29f3af711e99e8789f49fac
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