一、碧迪流式+单细胞测序一站式
解决方案,解析细胞多样性
流式细胞术与单细胞测序技术,均为生命科学研究的关键技术。在研究中,有效利用两种技术的优势与特点,不仅可以实现特定细胞群体的高效分离和富集、细胞表型的多参数分析,还可以同步分析单细胞层面的蛋白与基因表达,为深入探究细胞复杂性与多样性提供了全面的多维分析手段。碧迪医疗(BD)作为全球流式技术和高通量微孔单细胞测序技术的引领者,提供了碧迪流式+单细胞测序一站式解决方案。
通过BD流式分选、BD单细胞测序多维分析,探索细胞新机制、新靶点;通过BD流式分析验证上述新发现。
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BD流式抗体与BD单细胞测序抗体同一克隆号,检测结果一致。
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BD单细胞测序与BD流式,同一数据分析体系,实验数据无缝对接。
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BD FAS技术&生信团队,从流式到单细胞测序,全程无断点支持,科研毫无后顾之忧。
二、碧迪流式抗体
与单细胞测序抗体共染方案
BD流式抗体与BD单细胞测序抗体源自同一抗体库、同一工厂,同克隆号确保流式平台检测结果与单细胞测序结果一致性更高,增强了实验结论的可靠性。而为了更适用于单细胞多维研究,碧迪医疗还推出了流式抗体与单细胞测序抗体共染方案:
碧迪流式荧光抗体+BD Abseq寡核苷酸偶联抗体共染
高质高效
有效减少未结合寡核苷酸偶联抗体(BD® AbSeq)而产生的背景噪声;
将洗涤造成的细胞损失降至最低,尤其是对于分选后细胞数较低的情况显得尤为重要(清洗步骤可能会造成更严重的细胞损失)。
一体化
碧迪医疗流式荧光抗体和BD AbSeq 抗体具有完全一致的克隆号,从分选到单细胞测序,全程数据无缝对接。
标准化
碧迪医疗提供标准化的细胞共染流程。(具体请参考“使用荧光抗体和碧迪医疗寡核苷酸偶联抗体共染细胞”,>100 万个细胞的优化共染方案)
细胞共染工作流程
A. 相同克隆抗体共染:(步骤1)向在BD Pharmingen™ 染色缓冲液(FBS)中悬浮的细胞中加入具有相同克隆的等量(μg)荧光抗体和寡核苷酸偶联抗体(BD® AbSeq 寡核苷酸偶联抗体或碧迪医疗单细胞测序多样本分析试剂盒)。(步骤2)将抗体和细胞混合物在冰上孵育10 分钟。(步骤3)将剩余荧光抗体和寡核苷酸偶联抗体添加到混合物中,最终体积为200μL。(步骤4)将所有抗体和细胞混合物在冰上孵育30至60分钟,然后进行细胞洗涤。
B. 使用具有唯一特异性的抗体共染细胞:(步骤1)在单个步骤中,将所有具有唯一特异性的荧光抗体和寡核苷酸偶联抗体(BD AbSeq 寡核苷酸偶联抗体或碧迪医疗单细胞测序多样本分析试剂盒)与BD Pharmingen™ 染色缓冲液(FBS)中的悬浮细胞结合,最终体积为200μL。(步骤2)将所有抗体和细胞混合物在冰上孵育30至60分钟,然后进行细胞洗涤。
三、碧迪医疗单细胞测序抗体
与流式抗体联合使用案例
案例1 - Abseq在BD单细胞测序中识别的亚群可通过BD流式技术重现,并实现目标细胞的分选以进行下游功能分析。一旦亚群确立,客户通常会探究其生物学功能,例如免疫抑制效应;在免疫研究中,常见技术包括利用流式分选T细胞与肿瘤细胞共培养,并通过细胞增殖实验评估免疫抑制效果。
案例2 - BD单细胞WTA+Abseq测序技术可基于蛋白表达差异划分亚群,并通过同克隆号流式抗体进行验证。例如,Triana S等人利用12个蛋白标记物成功鉴定出干细胞的14个亚群,定义了流式gate strategy。