近日,Biology of Reproduction发表了标题为 PPARG is dispensable for bovine embryo development up to tubular stages的研究论文,报道了PPARG敲除对牛胚胎发育到胚胎伸长阶段没有影响。
在囊胚孵化后,有蹄类胚胎经历一个被称为延伸的长时间植入前阶段。受孕延长期是胚胎丢失的高度敏感期,因为它被认为是最容易发生胚胎丧失的时期。受孕延长依赖于子宫腺的分泌物,它调节子宫液(UF)的组成以满足胚胎的需要。对UF组成的研究已经发现了大量的代谢物和蛋白质可能是延伸所必需的。
PPARG是一种脂质信号传导受体,在绵羊胚胎和子宫内膜中均有表达,并且在牛和绵羊胚胎伸长过程中表达增加。之前的研究表明,通过向母羊子宫内注射Morpholino反义寡核苷酸(MAO)降低PPARG的表达会严重损害胚胎伸长,进一步证明了其在妊娠延长过程中的相关作用。然而,由于这种方法在子宫和妊娠中都诱导了PPARG的下调,PPARG在妊娠中的具体作用仍未被探索。
本实验通过两种独立的基因敲除策略(CRISPR/Cas9和BE3)在体外生成牛PPARG敲除(KO)胚胎,并评估KO胚胎的发育能力,从而进一步探究PPARG对牛早期妊娠延长是否必要。
Fig.1体外发育至第8天囊胚的发育分析
Fig.2体外孵化后发育至12天的发育分析
Fig.3体内发育至管状阶段(E14)的发育分析
结果显示,PPARG敲除对牛胚胎发育至囊胚阶段没有影响。PPARG 敲除对牛胚胎孵化后发育至D12没有影响,包括胚胎直径、外胚层细胞数量和胚胎盘形成。PPARG敲除对牛胚胎发育至E14管状阶段没有影响,包括胚外膜和胚胎盘的形成。
结论:PPARG敲除对牛胚胎发育至管状期没有影响,PPARG基因对牛胚胎早期发育不是必需的。
原文链接:https://doi.org/10.1093/biolre/ioae083