核酸释放剂的临床应用

文摘   2024-09-21 22:58   广东  

      荧光定量PCR检测病原体核酸技术具备敏感度高,特异性强的特点,已经基本实现了临床普及,如人的冠状病毒检测,猪的非洲猪瘟病毒检测,猪的痕迹鉴定检测等。

      荧光定量PCR检测病原体核酸技术实现的前提条件是获取高纯度的核酸,该技术主要由裂解-吸附-清洗-洗脱等环节构成,可以人工操作,也可以通过机器自动完成。总体上说,人工过膜吸附的提取纯化效率要高于机器自动提取操作的效率。

      不过,无论是人工过膜,还是机器磁珠吸附,过程相对复杂,耗时较长,提取的核酸损耗较大。

      采用核酸释放剂,将样品直接加入核酸释放剂中,无任何损耗,也无须水浴,无须酶解。

      核酸释放剂自身不干扰PCR反应过程,属于全封闭一体化进程,操作简便,过程简单,技术要求较低,节省反应时间。

       整个过程如下:取试管加入采集的样品,可以是液体,也可以是棉签,加入适量核酸释放剂,混匀或弃去棉签,静置,使得颗粒物发生沉淀,上清即可直接用于PCR反应模板。

        第一步:将采样棉签插入或样品加入核酸释放剂中,稍微搅动或混匀,弃去棉签。

        第二步:直接吸取反应模板加入PCR反应液体中。

       采用核酸释放剂,样本用量相对较少,没有经过浓缩过程,PCR反应后的CT值相对较高,但不影响结果判定。 

       核酸释放剂,让PCR或RT-PCR更快捷,远离核酸提取的烦恼。

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