研究团队将随机照明显微镜（RIM）与扩展景深（EDF）技术相结合，开发了一种EDF-RIM系统（如图1）。在该系统当中，团队采用散斑照明方式，并结合点扩散函数（PSF），使用可变形聚合物的电调透镜（ETL）快速扫描成像平面，进行成像检测。
在进行生物组织成像的应用中，团队首先对约5 μm厚的人工培养的肌动蛋白细胞骨架（Phalloidin-alexa488）进行荧光成像（如图2），比较了在相同视场和相同光子预算下，EDF-RIM、标准EDF-宽视场和Wiener反卷积的EDF-宽视场的成像结果。结果表明，在成像的对比度和分辨率方面，EDF-RIM、Wiener反卷积的EDF-宽视场，均优于标准EDF-宽视场成像；且EDF-RIM明显优于反卷积方案，分辨率提高了近1.7倍。
图3. EDF-RIM与2D-RIM的比较
总结展望
研究团队通过结合随机照明显微镜（RIM）超分辨率技术与扩展景深（EDF）投影快速成像技术，并使用散斑照明获取3D结构，开发了一种高时空分辨率的宽视场显微镜系统。
未来，该显微系统中的照明系统可以采用高空间频率的贝塞尔光束进行改进，实现真正的z方向上不变的照明，尤其在处理非表面分布的样本时，能够进一步改善图像的反演过程，提高空间分辨率。
Mazzella, L., Mangeat, T., Giroussens, G. et al. Extended-depth of field random illumination microscopy, EDF-RIM, provides super-resolved projective imaging. Light Sci Appl 13, 285 (2024).
https://doi.org/10.1038/s41377-024-01612-0
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