Hortic Res | 上海交通大学发现Ser126是决定异戊烯二磷酸异构酶(YFT3/IDI1)活性的关键氨基酸残基

学术   2024-11-01 21:32   英国  

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番茄Solanum lycopersicum是果蔬兼用主要世界性园艺作物。作为重要感观性状,果色引诱食果动物取食并促进种子传播的重要生物属性,还与番茄产业发展和消费者选择密切相关。果色也是番茄果实成熟的一个重要标志,并经历了复杂的生理和生化过程及环境因素影响;尽管番茄果色形成已被广泛深入地研究,而其复杂的生物学过程仍有诸多待阐明的科学问题。


2024年9月,Horticulture Research上线了(Advance Access)上海交通大学农业与生物学院赵凌侠教授课题组题为Mutation of YFT3, an isomerase in the isoprenoid biosynthetic pathway, impairs its catalytic activity and carotenoid accumulation in tomato fruit的研究论文。


本研究针对番茄黄果突变体yft3yellow fruited-tomato 3, e9292,用图位克隆技术发现了yft3 突变体的YFT3 allele 启始密码子下游2117bp处发生颠换突变(A2117C),导致所编码YFT3 allele /SlIDI1(isopentenyl diphosphate isomerase 1 in S.lycopersicum蛋白发生Ser126Arg置换。令人惊奇的是,YFT3 allele突变使转录表达在yft3突变体中显著上调,与类胡萝卜合成相关MEP(2-C-Methyl-D-erythritol 4-phosphate pathway)和CSP(Carotenoid synthesis pathway)基因DXR, DXS, HDR, PSY1, CRTISO, CYCB, CYP97A, 和 NCEDyft3和YF3-KO黄果系与野生型红果M82相比也表现出上调表达。不过,YFT3 allele 突变未影响其在yft3突变体蛋白合成和定位于质体中;而该突变却影响了yft3番茄有色体发育和类胡萝卜素的累积。分子对接和酶化学in vivo in vitro分析发现, Ser126Agr置换,改变了YFT3 allele蛋白结构并影响了与底物IPP(isopentenyl diphosphate)/DAMPP(dimethylallyl diphosphate)对接位点和与二价金属离子(Mg2+互作,其催化IPP和DAMPP异构活性被严重削弱,影响了CSP途径前体物质GGPP(Geranylgeranyl diphosphate)合成,使yft3突变体类胡萝卜素累积降低而呈现黄果表型。这些结果显示,Ser126是确保YFY3/SlIDI1生物活性的关键位点,将为番茄品质育种和遗传改良提供重要遗传信息。


图1 YFT3在番茄果实中功能互补实验

图2 YFT3YFT3 allele 亚细胞定位和蛋白水平表达

图3异戊烯二磷酸异构酶(YFT3/IDI1)Ser126Arg突变改了番茄果色


上海交通大学农业与生物学院李文贞博士(现在贵州省旱粮研究所)为论文的第一作者,赵凌侠教授为该文的通讯作者。该研究获得了国家自然科学基金(32072583、32372694),上海市现代种业协同创新中心基金(ZXWH2150201/010)及上海和昆山番茄新种质创新中心基金(SJYY2022-T001)资助。


上海交通大学农业与生物学院赵凌侠团队主要聚焦于番茄品质形成和果色发育研究,基于正向遗传学理论借助番茄突变体库挖掘番茄果色形成关键基因,通过对关键基因功能解析阐释番茄果色形成遗传机制。同时,其近年利用番茄传家宝和野生资源在番茄种质创新方面也开展了一些有益工作。在Nat Chem Biol、The Plant Cell、JXB、TAG 和PBM发表学术论文70余篇,主编《番茄野生资源》和《番茄传家宝种质资源图鉴》2部,参编《番茄遗传育种研究》、《分子生物学》、《基因工程原理与技术》3部;国家发明专利授权5项,培育番茄新品种3个。近年来主持和参加国家自然科学基金面上项目、国家重点研发项目和上海市科委基础重点和科技攻关项目10余项。本团队欢迎优秀博士和博士后加盟或合作,长期有效。
文章链接:
https://doi.org/10.1093/hr/uhae202


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