生物碱中的极品----尼古丁的检测方法开发思路分享

企业   2024-07-04 17:20   上海  

(图片来源:baotu)

尼古丁是一种生物碱,存在于茄科植物(包括烟草)中。生物碱是存在于自然界中的一类含氮的碱性有机化合物,有类似碱的性质。例如麻黄碱、咖啡碱、阿托品等物质都属于生物碱。

人们在吸烟时吸入尼古丁,尼古丁被吸入后经由血液传送,通过血-脑脊液屏障,平均只需要10秒即可到达脑部,促使大脑产生令人感到愉悦和兴奋的多巴胺及其他神经递质。但这种作用很快就会消失,从而使吸烟者在不吸烟时产生烦躁不安、易怒等反应,随之本能的渴望就是再次吸烟。所以客观来讲,吸烟容易上瘾在很大程度上确实是尼古丁造成的。

尼古丁有一定的危害,但目前尼古丁的检测方法还比较少。本文将提供一种尼古丁的检测方法,并简单分享方法开发的思路。

尼古丁的现有的检测方法非常少。采用常规的C18柱进行分析,尼古丁在C18柱上保留非常弱,不利于定量。而在质谱分析时,使用ESI源正模式,在酸性条件下,尼古丁的结构带上正电,则可以使用离子交换模式进行分析。

我们选择月旭两性离子色谱柱(选择此色谱柱的原因见文末),并摸索实验条件如下:


实验条件

色谱柱:UItimate® DLC UHPLC HILIC Amphion II(2.1×100mm,1.8μm)

流动相:A:10mmol/L甲酸铵溶液 B:乙腈

柱温:30℃

流速:0.3mL/min

进样量:5μL

色谱条件:

时间/min

A相/%

B相/%

0

20

80

15

20

80

质谱条件:

离子源:ESI+

检测方式:MRM

干燥气:氮气,400℃

流速:1000L/Hr

碰撞气:氩气

离子喷雾电压:3kV

名称

母离子(m/z)

子离子(m/z)

Cone

 (V)

Collision

 (V)

Polarity

Nicotine

163.2

106.1 

38

12

Positive

117.1

28

132.1

12


谱图


总结

在此条件下使用月旭UItimate® DLC UHPLC HILIC Amphion II(2.1×100mm,1.8μm)色谱柱,可实现尼古丁的分析检测,其保留时间、峰形均较好。由于尼古丁在实际样品中属于最难分析的一个成分,解决了尼古丁的检测问题使样品中其他成分的分离也迎刃而解。

最后,我们再来看看色谱柱的筛选过程。为什么两性离子色谱柱很适合本项目?让我们一起来看下。


HILIC Amphion II两性离子色谱柱小档案

● 适用于大多数极性化合物的分离,流动相一般用乙腈和水即可,不需要使用离子对试剂。

 填料结构同时含有阴阳离子,同时存在正电荷中心和负电荷中心,因而可以通过离子交换机制极大增强对酸碱化合物的保留。

 具有很好的亲水性,适合HILIC模式下分离极性、亲水性的小分子或碱性化合物。

作者:庞庆龄

排版:赵林

审核:邹天骏

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