色谱柱作为色谱分析的核心部件，为适应各种不同的分离需求，色谱填料也有不同的键合相。因此，色谱填料也发展成为一个庞大的“家族”。
月旭旗下的色谱柱也有数十种之多，因键合方式的不同，哪怕同为C18柱，选择性差异也会非常大。用不同款的色谱柱来做同一个项目，分离效果、出峰顺序、保留时间等均会有所不同。因此，在色谱分析中，选择合适的色谱柱至关重要。本文就带领大家认识一下月旭品牌的C18柱大家族。
01 月旭C18柱的填料参数
02 月旭品牌各C18柱工艺特点与“专长”
Ultimate® LP-C18为低pH条件的首选
填料工艺特点：采用侧链位阻保护屏蔽羟基；未封端。
色谱分离特点：
1.侧链位阻保护使色谱柱能耐受更低pH值。
2.侧链位阻保护基团使色谱柱具有不同的选择性，且在异构体分离上有独特的效果。
3.未封端，使其表面残留了更多的硅羟基，这些硅羟基的存在使其具有不同的选择性。
4.强酸条件下，用ELSD检测器都能获得理想的基线噪音，说明强酸条件下的键合相流失小。
5.能耐100%-0%水相的条件。
• 案例
流动相：10mM磷酸盐缓冲液（2g/L己烷磺酸钠，用磷酸调pH1.8）/乙腈梯度
图1 Ultimate® LP-C18适用于低pH值条件
案例中的成分，在pH2.5时，因流动相的pH不能使样品完全离子化，导致峰分叉，峰形不满足检测需求。将pH降到1.8时，样品完全离子化，能获得较好的峰形，满足检测需求。但此条件的pH低，在多数C18色谱柱的pH值的临界点或超出其承受范围，如勉强使用，会对色谱柱的寿命产生比较大的影响，若采用Ultimate® LP-C18则不存在这个问题，可以放心使用。
Ultimate® XS-C18
填料工艺特点：独特的多层键合工艺，键合密度大。
色谱分离特点：
1.多层键合工艺，键合密度大，配基间空间距离近，使色谱柱具有卓越的空间位阻选择性。
2.柱效高，柱容量高，碳载量高。
3.对于小分子异构体选择性突出，如同分异构体，位置异构体等。
• 案例
流动相：乙腈/水梯度
图2 使用Ultimate® XB-C18、 XS-C18
和LP-C18分离异构体效果对比图
案例中，采用Ultimate® XB-C18时，两个组分峰完全合并，采用月旭两款对分离异构体有效果的Ultimate® XS-C18和Ultimate® LP-C18进行分离，均能得到完全分离的两个峰。在此项目上，Ultimate® XS-C18的分离度优于Ultimate® LP-C18。
Xtimate® C18为高pH条件的首选
填料工艺特点：Xtimate® C18采用月旭专利的有机-无机杂化表面技术对硅胶基质进行改性处理。
色谱分离特点：
1.有机-无机杂化表面技术使其能够在较宽pH范围内使用。哪怕在最高pH的苛刻条件下，亦有非常稳定的性能和更长的寿命。
2.对碱性易拖尾物质也有极佳的峰形。
3.有机无机杂化表面技术，产生了与其他类型柱子不一样的选择性。
• 案例
流动相：5g/L乙酸铵溶液(氨水调节pH至7.0)/乙腈梯度
图3 使用常规柱和Xtimate® C18色谱柱
测碱性物质的峰形对比图
甲氧氯普胺及其杂质分离，使用Xtimate® C18进行检测，较Ultimate® XB-C18，峰形更加对称，峰宽变窄，从而使两个峰的分离度由2.5增加到4.65。理论塔板数也由1.5万升高到2.5万。
Ultimate® Polar RP色谱柱
填料工艺特点：嵌入极性基团。
色谱分离特点：
1.极性基团的嵌入，增加了亲水性，能耐受纯水流动相。
2.极性基团的嵌入，产生了不一样的选择性。
3.对极性物质的保留和选择性更佳。
4.对碱性物质也有极佳的峰形。
• 案例
流动相：乙腈/0.05mol/L磷酸二氢铵溶液=2/98
图4 强极性弱保留物质在常规柱和
Ultimate® Polar RP色谱柱的保留差异对比图
羟苯磺酸钙有关物质检测时：在Ultimate® XB-C18中，保留时间1.4分钟的两个杂质与溶剂峰完全合并，有分离趋势。更换为Ultimate® Polar RP后，两个杂质与溶剂峰分开，并且杂质峰之间也完全分离，分离度达到1.5。这是Ultimate® Polar RP中的极性嵌入基团产生了作用，使两个弱保留物质的保留增强后的效果。同时，因Ultimate® Polar RP的酰胺有弱正电，与该羟苯磺酸钙中的磺酸基有静电作用，故而主峰拖尾因子也会较Ultimate® XB-C18大些。
Ultimate® ALK C18
填料工艺特点：混合型固定相；极性官能团封尾。
色谱分离特点：
1.具有疏水作用和静电作用力。
2.使用极性官能团封尾修饰，取代了大量的硅羟基位点，能有效防止生物碱与硅醇基的相互作用，改善碱性物质的峰形。
3.极性官能团封尾修饰，使填料具有亲水作用的性质，能通过流动相调整出快速分离相似样品。
4.混合型固定相，使其具有与其他类型的色谱柱的完全不一样的选择性。
• 案例
流动相：磷酸氢二钾缓冲液（含1.7g/L四丁基硫酸氢铵，磷酸调pH4.6）/乙腈=98/2
图5
案例中，氨曲南在Xtimate® C18及其他款色谱柱上，峰是双峰，且峰形差，不满足检测要求。改用Ultimate® ALK C18后，能得到一个很漂亮的单峰，完全满足检测需求。而氨曲南结构中的末端氨基与羧基两个形成内盐，其它氮原子的碱性很弱，但是磺酸很强。在此条件下，pH4.6的时候，氨曲南解离不完全，因此在Xtimate® C18上呈现了双峰。而Ultimate® ALK C18，在pH4.6的情况下，有较多负电，所以，这个分子被排斥，因此峰形更好。
Ultimate® AQ-C18
填料工艺特点：极性基团封尾；双封尾工艺。
色谱分离特点：
1.使用极性基团封尾，增加填料的亲水性，能耐100%-0%水相的色谱条件。
2.极性基团封尾带来不一样的选择性。
Ultimate® Plus C18
填料工艺特点：双封尾工艺；低比表面积；低碳载量。
色谱分离特点：
抗污染能力强，为中药材及中药制剂检测首选。较其他款C18，保留稍弱，但需注意不耐纯水，需在10%以上有机相条件下使用。
作者：吴小梅 张文萱
排版：赵林
审核：骆初平
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