前沿:基于Kramers-Kronig关系的全角度分辨率增强的定量相位成像

文摘   科学   2024-08-14 09:10   北京  
撰稿人: 陈翔 博士研究生 南京师范大学  袁操今 教授 南京师范大学

研究背景

所有的记录介质或成像设备,如CCD/SCMOS,只响应光波场的强度信号,无法记录波前所携带的相位信息。对于高吸收率的振幅样品,可以很容易地获得样品信息。然而,在生物医学、光学测量等领域中,大多数感兴趣的样品都是透明的,吸收和散射能力较弱,其形态特征或折射率分布不能被成像设备直接检测到。为了获得透明样品的定量相位分布,定量相位成像技术由于其在生物样品测量中的无损优势而得到了广泛的应用。

近年来,基于Kramers-Kronig关系的方法因其非干涉非迭代的优势在定量相位成像方面显示出了很大的应用潜能。为了减少曝光次数,提出了基于彩色复用、偏振复用以及对称照明的方法,可以有效应用于实时定量相位测量。为了实现全角各向同性分辨率增强和相位恢复,Shen等人使用空间光调制器(SLM)有效控制其频域一半的频谱限制,以满足Kramers-Kronig关系的解析条件。然后利用Kramers-Kronig关系进行全角分辨率增强的相位重建。然而现有的技术仍无法实现单次曝光下全角度的定量相位恢复。

基于上述研究背景,本研究中,研究团队提出了一种互补照明来实现两倍各向同性分辨率增强的单次曝光的定量相位恢复技术。该技术利用环形照明光源,嵌入至商用尼康倒置显微镜中。通过设计照明模式,使每个照明模式下对应的频谱分布几乎占据整个样品频谱分布的一半,通过Kramers-Kronig关系重建样品的复振幅分布。此外,在实验中,利用波长复用将每种照明模式分配到不同的颜色通道(R/G/B),对Hela细胞和人体甲状腺组织切片进行相位重构,我们可以在单次曝光下实现全角度的超分辨定量相位检索。

导读

近日,南京师范大学物理科学与技术学院江苏省光电技术重点实验室研究团队在Optics Letters上发表题为“Full-angle single-shot quantitative phase imaging based on Kramers–Kronig relations ”的文章。博士生研究生陈翔为文章的第一作者,袁操今教授为通讯作者,南京师范大学为论文的唯一通讯单位。


主要研究内容

     本文提出了一种互补照明的新方法,能够在单次曝光下实现两倍各向同性分辨率增强的定量相位恢复。该技术利用可编程LED作为照明光源,嵌入至商用尼康倒置显微镜中。通过设计照明模式,使每个照明模式下对应的频谱分布几乎占据整个样品频谱分布的一半。在空域上,通过Kramers-Kronig关系在三个不同的方向上重建了样本的复振幅分布,从频域来看,将整个样品的频谱分成三部分进行重构,最终通过频谱拼接重构完整的频谱分布。在数值模拟中,我们以传统AIKK方法8次曝光获得的重建结果作为参考,通过应用互补照明的方法,将其分为三部分进行重建,其重建结果与led依次点亮8次获得的结果吻合,与正交方向的4次曝光相比,所提出方法能够实现全角度的分辨率增强。此外,在实验中,利用波长复用将每种照明模式分配到不同的颜色通道(R/G/B),对Hela细胞和人体甲状腺组织切片进行相位重构,我们可以在单次曝光下实现全角度的超分辨定量相位检索,重构结果也验证了该方法的有效性。由于多路复用技术,破坏了Kramers-Kronig关系所需的解析性,但由于占用的量较少,因此我们仍然认为它近似满足Kramers-Kronig关系的条件。通过利用Kramers-Kronig关系对测量的强度图像进行相位恢复。因此,在三组不同方向的LED模式下照明样品后,通过Kramers-Kronig关系实现全角分辨率增强的相位恢复。

图 1 该方法的流程图。(a)模拟的复振幅物体的Ground Truth。(b)三种照明模式及其照明下的强度和强度频谱分布。(c)重建的子频谱分布,插图为设计的滤波孔径以获得同一比例系数下的频谱分布。(d) 拼接获得完整的频谱分布。(e)重建的复振幅物体的振幅和相位

技术突破与创新点

在生物医学领域,无损定量相位恢复技术应用广泛,而全角度分辨率增强的相位测量通常需要多次曝光。为了降低环境干扰对相位测量的影响,提高系统的全角分辨率,提出了基于Kramers-Kronig关系的全角单次定量相位成像方法。传统的基于Kramers-Kronig关系的环形光照定量相位成像(AIKK)需要多次曝光,通过从不同方向依次照明目标物体来实现增强的全角度分辨率。在本研究中,对传统AIKK照明模式进行优化,不同光照模式之间不对称的光照排列可以弥补记录过程中由于频谱共轭而造成的频谱信息缺失,此外,对传统AIKK算法进行优化,在频谱合成前,利用频谱滤波器对重叠频谱进行校正,以获得统一比例系数下的频谱分布。在实验中,采用波长服用的思想,将三种照明模式分配到不同的颜色通道(R/G/B)以此实现单次记录,同时整个实验装置由商用的尼康倒置显微镜改装而成,使记录系统稳定、紧凑。

图 2 美国空军1951测试目标的仿真结果。(a)相位物体的地面真相(b)-(d)重建的相位图像显示其傅里叶光谱。(e1)第4组的曲线分布和(e2)第6-2组的曲线分布。

为了定量验证所提出方法可以在较少的曝光条件下实现全角分辨率的提高和相位重建。对一定角度旋转后的相位型1951分辨率测试目标进行了数值验证。采用了4次曝光和8次曝光下的重建的相位分布作为参考,对比结果如图2所示。图2(a)为相位测试目标的Ground Truth,图2(b-d)分别显示了四个正交方向、8次全角照明和三种不同照明模式下恢复的相位图及其对应的频谱分布。对比图2(b1-d1)中虚线方块中的图像,可以看出所提出方法获得的重建结果可以与8次全角度照明获得的重建结果相吻合,相对与正交方向上的四次照明,补全了斜对角方向的缺失的高频部分。图2(e1-e2)曲线分布也验证了该方法可以在较少的曝光时间下获得全角分辨率的增强和定量相位恢复。

在实验中,我们对Hela细胞和未染色的人体甲状腺组织切片进行了成像,实验中采用8次曝光的重建结果作为参考值,给出了单个波长三次曝光的重建结果以及波长复用照明下单次曝光获得的重建结果,并计算参考值与这两种照明模式下的结果之间的特征相似度(FSIM)指数,以此来验证所提出方法的有效性。实验结果如图3和图4所示。

图 3 HELA细胞的实验结果。(a)8次照明下的相位重建结果(b)1次曝光下的彩色原始图像。(c1)8次曝光下重建的相位及其对应的傅里叶谱(c2)。(d1)3次曝光下重建的相位及其对应的傅里叶谱(d2)。(e1)单次曝光下重建的相位及其对应的傅里叶谱(e2)

图 4 人体甲状腺组织切片的实验结果。(a1)8次曝光下的振幅。(a2)彩色原始图像。(b)和(c)在三种方法下重建的振幅和相位

结论与展望

本研究提出了一种基于Kramers-Kronig关系的互补照明模式来实现全角分辨率增强的定量相位成像,并利用波长复用来实现单次曝光的目的。与传统的AIKK方法相比,该方法可以提高87.5%的成像效率,从仿真和实验结果可以看出,该方法具有更高的成像效率和精度。然而,波长复用的引入应进一步纠正引起的色散问题,以防止失真。我们期待该方法能够有效地应用于非损伤生物医学成像、光学表面测量等精度测量领域。

文章信息

Full-angle single-shot quantitative phase imaging based on Kramers–Kronig relations

XIANG CHEN, SIHONG YAO, JUNAN SONG, TIANWEI DING, GUOQING LI, JIAWEI SONG, SHOUPING NIE, JUN MA, AND CAOJIN YUAN

Optics Letters

       DOI: https://doi.org/10.1364/OL.524825

主要作者介绍

陈翔,博士研究生,2021年本科毕业于南京师范大学物理科学与技术学院,2021年开始硕博连读在南京师范大学物理科学与技术学院攻读博士学位,主要从事超分辨成像,定量相位成像等方向的研究。

姚斯宏,硕士研究生,2021年开始在南京师范大学物理科学与技术学院攻读硕士学位,主要从事结构照明显微成像,荧光成像等方向的研究。

袁操今,授,博士生导师,主要研究方向显微超分辨成像、光场调控技术和光学信息安全技术。2008年南开大学获光学工程博士学位;2009-2011洪堡学者,在德国斯图加特大学应用光学研究所博士后研究;2013年至今南京师范大学物理科学与技术学院教授、博士生导师,先后主持包括国家自然科学基金项目在内的多项科研项目。在Applied Physics Letters、Optics Letters、Optics Express等国际知名刊物发表SCI论文60余篇,完成英文著作一章节,获授权国家发明专利6项。先后入选南京师范大学“百人计划”、 南京师范大学“青蓝工程”人才计划。现任全息与光信息处理专委会委员、南京光通信学会理事。


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