2024年11月15日，中国科学院遗传与发育生物学研究所杨宝军团队和根特大学Bert De Rybel研究组合作在Science 在线发表了题为SPL13 controls a root apical meristem phase change by triggering oriented cell divisions的研究论文。该研究展示了根系形态的时空变化过程及背后的分子机制。该研究通过建立植物细胞分裂方向筛选系统并测试超过15000个化合物，获得了可以影响植物细胞分裂方向变化的小分子化合物coral7。进一步的研究发现coral7通过影响转录因子SPL13（SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE）的表达调控细胞分裂方向。该研究揭示了SPL类转录因子可以通过影响细胞细胞分裂方向控制根分生组织的形态特征和时空变化，为重塑植物根系形态提供了有效策略。
化学遗传学策略可以有效克服基因冗余或者遗传突变致死带来的研究难题。为了寻找控制植物细胞分裂方向的关键因子，研究团队首先建立一套显示细胞分裂方向变化的形态学筛选系统。通过结合双色标记植物BY2细胞及高通量荧光共聚焦快速筛选策略并对超过15000个化合物进行细胞成像筛选，有效获得了在细胞系和植物中均可控制细胞分裂方向变化的化合物coral7（图1）。随后，研究团队尝试对coral7进行化学修饰以期获得其直接蛋白靶标，但是由于标记后的化合物缺乏生物学活性，研究人员进一步尝试转录组测序手段挖掘coral7可能影响的关键基因。
图1. 基于植物细胞形态的分裂方向筛选系统及Coral7化合物效果
利用coral7处理根系的多时间点取样结合上调基因的筛选方法，研究团队发现转录因子SPL13在植物中过量表达后可以明显改变根系形态。横切结果表明多种类型的细胞分裂方向均发生变化并导致根分生区变粗（图2），说明coral7可以通过SPL13调控细胞分裂方向变化。后续的SPL13表达分析和突变体实验进一步证明了coral7通过促进SPL13的表达诱导了细胞分裂方向的变化。
图2. 过量表达AtSPL13可以有效改变根分生区细胞分裂方向并实现增粗
前期研究结果表明，SPLs是植物年龄和开花途径的关键调控因子。为了寻找SPL13及其同源基因在根分生组织中调控细胞分裂方向的生物学意义，研究团队系统分析了植物根系分生区随时间变化的形态特征。结果表明生长后期的根系相比较早期的分生区在形态特征上会发生明显变化，包括中间皮层的形成（middle cortex）及分生区显著增粗（10-40天）。相关的形态转变都需要细胞分裂方向的重新调整并引入更多的平周分裂（periclinal division）。基于SPL13及相关同源基因的时空表达，研究发现相比较野生型材料，spl突变体在中间皮层的形成和分生区增粗方面均发生了明显缺陷（图3）。表明SPL通过精确的时空表达来控制细胞分裂方向以实现根系增粗。对SPL13下游基因的分析发现其可以有效激活细胞分裂相关基因CYCB1及内皮层细胞分裂方向基因CYCD6;1的表达，并依赖于SHR途径。另外，通过对单子叶植物水稻及相关spl突变体的分析，同样发现SPL在水稻的根分生区细胞分裂方向及根系增粗中的关键作用，表明SPL是植物保守的根系形态（粗度）重塑基因。
图3. AtSPLs在拟南芥根系增粗中发挥了关键作用
综上所述，该研究通过化学遗传学并结合细胞体系的筛选策略，有效的获得了控制细胞分裂方向的化合物coral7；并进一步发现转录因子SPLs的新生物学功能：控制植物细胞分裂方向。该研究同时揭示了SPL分子模块参与根系的时空形态重塑，为实现根系遗传改良和重塑（如增粗）提供了关键位点（图4）。
图4：土壤中根系形态的时空变化机制及根系增粗策略
中国科学院遗传与发育生物学研究所杨宝军研究员为该论文的第一作者和通讯作者，根特大学博士研究生孙延彪为共同第一作者，根特大学Bert De Rybel教授为共同通讯作者。此外，遗传发育所助理研究员葛艳花和硕士研究生岳倩如作为共同作者为该研究做出重要贡献。该研究特别感谢国家自然科学基金委“原创探索计划-32350005植物细胞分裂方向控制的四维理论”对该项目提供的重要资助；该研究同时得到了国家自然科学基金面上项目及欧洲ERC等项目的资助。
目前杨宝军课题组招聘博士后和助理/副研究员2-3名，以及具备常规分子生物学，生化相关或生信分析背景的技术员2-3名（本科及以上）。欢迎对细胞分裂方向控制机制及根系生物学感兴趣的科研人员加入。详情见遗传发育所官网招聘信息或邮件联系bjyang@genetics.ac.cn。
论文链接：
https://www.science.org/doi/10.1126/science.ado4298 来源：BioArt植物
