NanoDrop One/OneC超微量分光光度计操作简单且定量精准，只需极少量的样品就可以实现对DNA、RNA和蛋白质的快速定量及定性分析，同时还可获得全光谱数据。大家是不是很好奇它的检测原理是什么呢，下面就和小编一起来看看吧~~
PART 01
检测原理
NanoDrop One/OneC超微量分光光度计通过光纤技术和液体表面张力特性来达到测定样品的目的，可轻松实现快速微量检测。
为什么简简单单往基座上滴加1-2μL样品就可以进行检测了呢？咦，原来是因为嵌入上基座内的光纤用来连接光源，嵌入下基座内的光纤用于连接检测器，当仪器检测臂降下时，样品将形成一个液柱，弥合两根光纤之间的空隙，从而实现样品检测。
PART 02
吸收光谱
当光通过液柱到达检测器会生成吸光度（Y轴）/波长（X轴）的光谱图，显示样品在每个检测波长吸收的光。
仪器光谱检测范围为190nm至850nm，显示的范围可能会因为不同应用模块而有所不同。下图为核酸样品（左）和蛋白样品（BSA，右）采集的吸光度光谱。
核酸
蛋白
注意: 样品蒸发会影响检测精度，因此在完成加样或空白样后,需快速下放检测臂。
PART 03
样品吸光度
多波长的光源，通过系列分光装置，产生特定波长的光源，光线透过测试样品后，部分光线被吸收，计算得到样品吸光度。当仪器进行空白检测时，将采集并储存空白检测溶液的参照光谱，随后每次进行样品检测时，将按照下方等式来计算样品吸光度。
PART 04
样品浓度
检测样品吸光度后，仪器会自动转化为样品浓度，根据Beer-Lambert等式(Beer定律)样品吸光度和浓度成正比。
Beer-Lambert 等式
c = A * [1/(ε * b)] =A*f
其中:
A=均一化为1cm光程的吸光度，以吸光度单位表示(A)；
ε=样品的消光系数，单位为升/摩尔·厘米；
b=光程，单位为厘米；
光程是两个基座之间的距离，仪器会自动选择最佳测试光程为依据，并均一化为1cm光程后的值用于计算样品浓度。
c=分析物浓度，单位为摩尔/升或摩尔单位(M)；
f=浓度转化系数，单位为ng·cm/μL。
NanoDrop系统：双链DNA系数为50ng·cm/μL；单链DNA系数为33ng·cm/μL；RNA系数为40ng·cm/μL。
PART 05
基线矫正
对于某些应用，因为不同实验溶液条件及检测器自身背景信号，样品吸光度可能存在偏差，使用基线矫正来降低光谱中由于光散射粒子导致的偏移。所谓基线矫正是指系统从样品所有波长的吸光度值减去基线矫正波长处的吸光度值，对结果进行修正。下图蛋白样品检测结果界面就显示了采用340nm基线矫正算法。
下期再见
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