【文献速递】中苜一号紫花苜蓿幼苗对混合盐碱胁迫的响应

文摘   三农   2024-09-23 15:24   内蒙古  

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引用本文

DOI:10.16742/j.zgcdxb.20240237

朱晨晨,史昆,何沁坤,等. 中苜一号紫花苜蓿幼苗对混合盐碱胁迫的响应[J].中国草地学报,2024,46(8):1-9.

ZHU Chenchen, SHI Kun, HE Qinkun,et al.Response of ‘Zhongmu No.1’ alfalfa seedlings to mixed saline-alkali stress[J].Chinese Journal of Grassland,2024,46(8):1-9.

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中苜一号紫花苜蓿幼苗对混合盐碱胁迫的响应




朱晨晨1,史昆1何沁坤1,迪力穆拉提·阿卜杜外力1,刘亚玲2,王赞1,*

1. 中国农业大学草业科学与技术学院;2. 内蒙古草业技术创新中心有限公司


摘要 & 关键词

本研究以中苜一号紫花苜蓿(Medicago sativa L. cv. Zhongmu No.1)为试验材料,分别进行浓度为0、40、80 mmol/L的混合盐碱胁迫(NaCl、Na2SO4Na2CO3NaHCO3摩 尔 比 为1∶1∶1∶1,pH值为9.3)处理,测定其生长指标、生理指标及关键基因的表达水平,以期揭示其响应混合盐碱胁迫的机制。结果表明:随着混合盐碱胁迫程度的加剧,中苜一号紫花苜蓿幼苗的株高、光合速率、PSⅡ的有效量子产率和最大光化学量子产量均被显著抑制(P<0.05 );过氧化氢、超氧阴离子和丙二醛积累量逐渐增多,过氧化物酶活性、脯氨酸和可溶性糖含量均显著增加(P<0.05 );在80 mmol/L混合盐碱胁迫下,Na+转运蛋白的编码基因MsSOS1MsNHX1MsHKT1的表达量均显著提高(P<0.05 )。综合分析表明,中苜一号紫花苜蓿可能主要通过以下途径响应混合盐碱胁迫:(1)高表达MsSOS1MsNHX1MsHKT1等Na+转运蛋白编码基因,促进Na+外排、液泡区隔化及转移,避免因Na+大量积累对植株造成离子毒害;(2)增强抗氧化酶活性,缓解由高pH值带来的氧化损伤。




中苜一号紫花苜蓿;混合盐碱胁迫;生理特性;基因表达












混合盐碱胁迫初期的中苜一号紫花苜蓿(照片由作者提供)


土壤盐碱化是农业生产的主要限制因素之一。在自然界中,根据盐的种类不同,盐碱胁迫可分为中性盐胁迫(盐胁迫)、碱性盐胁迫(碱胁迫)和混合盐胁迫三种类型,而植物已进化出多种策略来适应盐碱胁迫造成的伤害。以保定苜蓿、南皮苜蓿、 RS 苜蓿和秘鲁苜蓿为亲本材料选育的中苜一号紫花苜蓿(Medicago sativa L. cv. Zhongmu No.1)具有一定的耐盐性,然而,混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿幼苗的影响鲜有报道。本研究通过测定混合盐碱胁迫下中苜一号紫花苜蓿幼苗的生长指标、生理指标及关键基因的表达水平,阐释中苜一号紫花苜蓿响应混合盐碱胁迫机制,为深入探究紫花苜蓿耐混合盐碱机制及种质创制提供参考。



01  材料与方法



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1.1 试验材料

中苜一号紫花苜蓿种子由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所杨青川研究员提供。
1.2 试验设计
随机选取15盆幼苗并均分为3组,一组为对照组(T0,浇灌蒸馏水),另两组为混合盐碱胁迫组,分别浇灌浓度40 mmol/L(T40)和80 mmol/L(T80)的混合盐碱溶液(即将等摩尔比的NaCl、Na2SO4Na2CO3NaHCO3混合,蒸馏水溶解,调节pH值至9.3),每3~5 d浇灌一次。处理4周左右,中苜一号紫花苜蓿出现明显胁迫表型,测定不同处理的生长指标、叶绿素含量、光合及荧光参数,并采集同一位置的叶片(将植株顶部向下第三至第五片叶子全都取下,混样用于指标测定),液氮速冻,-80 ℃保存,用于其他生理指标及基因表达的测定。

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02  结果与分析



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2.1 混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿幼苗株高和干重的影响

由图1可知,在混合盐碱胁迫处理下,中苜一号紫花苜蓿幼苗的株高和地上干重均受到显著抑制(P<0.05),地下干重的表现略有不同,地下干重在40 mmol/L混合盐碱胁迫处理下与对照相比无显著差异,但在80 mmol/L混合盐碱胁迫处理下显著降低(P<0.05)。综上表明,地下部受较低浓度混合盐碱胁迫的影响较小。 


2.2 混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿幼苗叶片光合参数的影响

从图2可看出,混合盐碱胁迫处理下,中苜一号紫花苜蓿幼苗叶片的叶绿素含量、光合速率和叶绿素荧光参数均不同程度地降低。其中,随着混合盐碱胁迫处理浓度的增加,叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素总含量及气孔导度在混合盐碱胁迫处理下均显著下降(P<0.05),但40 mmol/L和80 mmol/L混合盐碱胁迫处理之间无显著差异;净光合速率、PSⅡ的有效量子产率和PSⅡ最大光化学量子产量均逐渐显著下降(P<0.05),其中,净光合速率在80 mmol/L混合盐碱胁迫处理下受到严重抑制,下降幅度达79.7%。结果表明混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿幼苗的光合系统造成了损伤,光合作用下降可能是导致其株高和干重降低的原因。


2.3 混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿幼苗叶片渗透调节物质含量、抗氧化酶活性及离子含量的影响

由图3可知,混合盐碱胁迫处理下,中苜一号紫花苜蓿幼苗叶片中的脯氨酸和可溶性糖含量均逐渐显著增加(P<0.05),可减轻渗透胁迫对植株造成的伤害。

从图4可看出,混合盐碱胁迫导致中苜一号紫花苜蓿幼苗地上和地下部的Na+含量显著增加(P<0.05),K+/Na+比值显著下降(P<0.05),但在40 mmol/L和80 mmol/L混合盐碱胁迫处理之间无显著差异。综合而言,混合盐碱胁迫改变了中苜一号紫花苜蓿幼苗地上和地下部的离子转运,破坏了离子平衡。


由图5可知,混合盐碱胁迫处理导致中苜一号紫花苜蓿幼苗叶片中积累了更多的O2H2O2,丙二醛含量显著增加(P<0.05);另外, POD活性也显著增加(P<0.05),而SOD活性在混合盐碱浓度达到80 mmol/L时才显著增加(P<0.05)。综合表明,混合盐碱胁迫导致中苜一号紫花苜蓿幼苗积累了大量的活性氧,同时诱导增加抗氧化酶活性,减轻混合盐碱胁迫对植株造成的氧化损伤。


2.4 混合盐碱胁迫对中苜一号紫花苜蓿盐碱胁迫响应相关基因表达水平的影响

从图6可看出,混合盐碱胁迫改变了中苜一号紫花苜蓿幼苗中盐碱胁迫响应关键基因的表达。其中,超氧化物歧化酶编码基因MsSOD、过氧化物酶编码基因MsPOD、质膜Na+/H+反转运蛋白编码基因MsSOS1和Na+转运蛋白编码基因MsHKT1的表达水平在80 mmol/L混合盐碱胁迫处理下显著升高(P<0.05);随着混合盐碱胁迫浓度的增加,叶绿素维持基因MsSGR、脯氨酸合成关键基因MsP5CS1和编码液泡膜Na+/H+反转运蛋白的基因MsNHX1的表达水平均逐渐显著升高(P<0.05);Rubisco亚基稳定性相关基因MsRbcX2的表达水平在混合盐碱胁迫处理下显著升高,但与40 mmol/L混合盐碱胁迫处理相比,80 mmol/L混合盐碱胁迫处理下MsRbcX2的表达水平显著降低,这可能也是80 mmol/L混合盐碱胁迫处理下中苜一号紫花苜蓿幼苗的净光合速率显著下降的原因之一。

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03  结论



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混合盐碱胁迫显著影响中苜一号紫花苜蓿幼苗的株高、生物量、光合系统活性、离子平衡和ROS平衡。在混合盐碱胁迫下,中苜一号紫花苜蓿幼苗通过脯氨酸和可溶性糖含量增加以及SOD和POD活性提高来降低因渗透胁迫和氧化胁迫对其造成的损伤,同时,通过增加Na+转运蛋白MsSOS1、MsNHX1和MsHKT1编码基因的表达水平减少因Na+过度积累造成的离子毒害,从而提高对混合盐碱胁迫的耐受性,这可能也是其响应混合盐碱胁迫的重要机制。



制作:胡晓然

校对:陶彦彤

审核:胡卉芳






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