江南大学食品学院孙秀兰教授团队在Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题目为“Biochemical Characterization and Application of Zearalenone Lactone Hydrolase Fused with a Multifunctional Short Peptide”研究论文（多功能短肽融合玉米赤霉烯酮内酯水解酶的生化特性及应用）。 玉米赤霉烯酮（ZEN）是一种雌激素类霉菌毒素，对家畜有生殖毒性。目前，内酯水解酶用于ZEN的酶促降解，但大多数内酯水解酶存在降解效率低、热稳定性差等问题。ZHD518作为已证实的ZEN降解中性酶，在中性条件下表现出较高的酶活性。本研究将一个多功能多肽S1v1-(AEAEAHAH)2融合到ZHD518的N端，与野生型酶相比，该融合多肽的蛋白表达量提高了1.28倍，酶活力提高了9.27倍，45 ℃孵育10 min后的热稳定性提高了37.08倍，并且提高了酶在长期储存过程中的稳定性。此外，经过 S1v1-GS-ZHD518 处理 60 分钟后，玉米麸皮、玉米胚芽粉和玉米蛋白粉中的 ZEN 浓度分别从 5.29 ± 0.04、5.31 ± 0.03 和 5.30 ± 0.01 μg/g 降低至 0.48 ± 0.05、0.48 ± 0.06 和 0.21 ± 0.04 μg/g，降解率分别为 90.98%、91.00% 和 95.32%。总之，S1v1-GS-ZHD518 的高效降解性、耐高温和耐储存性为其在食品或饲料中的应用提供了可能性。Figure 1. (A) The schematic diagram of the recombinant protein S1v1-GS-ZHD518 expression cassette. (B) SDS-PAGE analysis of the recombinant protein was performed at each purification step.Figure 2. Enzymatic characterization of recombinant protein S1v1-GS-ZHD518.Figure 3. Chromatographic (at 1–6 min), mass spectrometry (at 6 min) and degradation mechanism of S1v1-GS-ZHD518 hydrolysates3.5. ZEN分子对接及S1v1-GS-ZHD518融合酶结构分析Figure 4. (A) Structural comparison of ZHD518 (blue) and S1v1-GS-ZHD518 (red); (B) The molecular docking map of S1v1-GS-ZHD518 and ZEN and the catalytic center of S1v1-GS-ZHD518.Figure 5. Effect of recombinant enzyme S1v1-GS-ZHD518 in degrading ZEN in various corn byproducts.https://doi.org/10.1021/acs.jafc.4c01296![]()
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