写在前面的话
WB玄学两个月的一些感悟和踩坑排雷！！
条带变形计
预制胶or自配胶
“V型”条带
纹理状条带
滞孔、拖尾
波浪条带
抱着以为预制胶是图方便的形态，刚接触WB时，一直使用预制胶（不同价位都尝试了）。但是发现预制胶跑出来的条带非常不好看，怀疑预制胶存在的意义，其实就是样本制备太糙，预制胶及其缓冲体系相比传统体系分辨率更高，在样品的处理上需要更为充分。
针对不同的异常，在样品处理的优化方式略有差异：
”V”型：适当增加变性剂比例，煮样10min，14000rpm高速离心，取上清上样。
条带纹理：高速离心去杂质。
波浪带型：超声处理10min，适当增加变性剂比例，煮样10min，14000rpm高速离心，取上清上样。
滞孔/拖尾：高速离心去杂质。
缓冲液变黄
原因如下：
1.电泳缓冲液重复使用或加液总量少 2.内槽漏液 3.高压电泳
条带弯曲
原因如下：
1.胶凝固不均匀
泳道连线
原因如下：
1.样本溢孔
泳道宽度不一
原因如下：
1.未水平竖直拔出梳子
边缘效应
原因如下：
1.边缘孔就别上样，无法避免
条带不美观
原因如下：
1.上样时过快 2.上样体积过大
转膜气泡/花膜
原因如下：
1.三明治结构存在气泡 。2.三明治结构出现移动。3.转膜液使用次数过多。4.转膜电压过大。5.三明治结构过松/过紧
总而言之，WB操作过程简单，但是步步细节导致无法重现“美好”条带，样本制备、电泳、转膜是“美好”条带的基础，一抗是最关键环节！！！唯一为实验室新收获的是一抗二抗洗脱液，“美好”条带重复利用！（吐槽）试了好几家的商用产品，终于！强推新赛美的蛋白印迹膜再生液/抗体剥离液！！！
