质粒已成为基因工程中一种简单常用的载体,但质粒提取真的简单吗?身边的科研人总会有这样的问题:
1
为什么我提取出来的质粒总是存在较高的内毒素残留?
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提取的质粒 DNA 为什么纯度总不高,导致后续实验(如转染、克隆等)失败。
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在提取过程中,质粒的产量为什么总是低于预期,影响实验的进展。
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细胞为什么总是裂解不完全。
想要解决以上问题,首先需要从源头把控,选择合适的质粒提取方案以获得足量质粒 DNA 用于下游的应用;以及规范样本的提取操作及保存条件,尽量降低 DNA 降解的风险。然而即使在非常小心的操作下,还是有可能遇到内毒素残留、质粒 DNA 纯度差的问题,我们该如何应对?
选择合适的质粒提取试剂盒不失为一种有效措施。
EZBioscience® 提供质粒小提和大提两款产品,可满足绝大部分科研工作者的需求。EZ-press Endofree Plasmid Mini Kit 属于质粒小提试剂盒,每个吸附柱可在 1~6 ml 过夜培养的菌液中提取得到多达 30 μg 的质粒。EZ-press Endofree Plasmid Maxi Kit 属于质粒大提试剂盒,每个吸附柱可在 100 ml 过夜培养的菌液中提取得到多达 500~1,500 μg 的质粒。如果您最近需要抽提质粒,快来免费试用这款无内毒素质粒提取试剂盒吧!
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EZ-press Endofree Plasmid Mini/Maxi Kit 就是满足上述需求的质粒提取试剂盒。它采用的是碱裂解法裂解细胞,提取过程中无需使用酚和氯仿等有机物。并且试剂盒的碱裂解液中还添加了颜色指示剂:裂解后的产物为蓝色,充分中和后产物变为白色,使操作实现了可视化,保证了提取质量。试剂盒的吸附柱搭配本公司专门研发的高效溶液系统,能够高度特异性地结合质粒 DNA,同时不吸附蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。使用该系列试剂盒提取的质粒 DNA 纯度高,内毒素残留量低(≤ 0.1 EU/μg),适用于多种细胞的转染及其他常规分子实验。
EZ-press Endofree Plasmid Mini/Maxi Kit 产品特点
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操作可视化:
碱裂解液中添加了颜色指示剂,使操作实现可视化,降低了操作难度,保证了提取质量。
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转染级(内毒素含量低):
采用离心柱法,搭配本公司专门研发的去除内毒素的高效溶液系统,进行质粒 DNA 的提取,提取得到的质粒 DNA 纯度高,内毒素残留量低(≤ 0.1 EU/μg),适用于多种细胞的转染及其他常规分子实验。
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得率高:
EZ-press Endofree Plasmid Mini Kit(小提)每个吸附柱可提取多达 30 μg 的质粒。EZ-press Endofree Plasmid Maxi Kit(大提)每个吸附柱可提取多达 500~1,500 μg 的质粒。
4
安全无毒:
不使用苯酚、氯仿等对健康有害的物质。
EZ-press Endofree Plasmid Mini Kit(小提)操作流程图
EZ-press Endofree Plasmid Maxi Kit(大提)操作流程图
EZ-press Endofree Plasmid Mini/Maxi Kit 代表性实验结果
EZ-press Endofree Plasmid Mini Kit 代表性实验结果
常规质粒提取结果
转染质粒提取结果
EZ-press Endofree Plasmid Max Kit代 表性实验结果
常规质粒提取结果
转染质粒提取结果
目前全国范围内已有多所大学和医院正在使用 EZBioscience® 分子生物学试剂盒:中科院上海生化细胞所、中科院上海药物所、中科院上海巴斯德所、中科院上海营养与健康所、中科院广州生物健康院、复旦大学、上海交通大学、浙江大学、中山大学、同济大学、华东师范大学、上海科技大学、上海中医药大学、南方医科大学、天津医科大学、广州医科大学、华南农业大学、瑞金医院、中山医院、华山医院、仁济医院、上海红房子医院、复旦附属眼耳鼻喉医院、交大附属六院、交大附属九院、孙逸仙纪念医院、国家儿童医学中心、国家呼吸医学中心等。
内容策划:邹礼平
内容审核:朱超敏
题图来源:自己做的