ac4C RNA乙酰化（N4-acetyicytidine，ac4C），N4位乙酰胞嘧啶，是真核原核生物中保守的化学修饰，早期研究认为ac4C主要存在于tRNA和18S rRNA上。近期研究显示，mRNA上也存在大量的ac4C，该修饰在促进蛋白翻译、影响RNA稳定性和可变剪接、调控基因表达发挥重要作用，是继m6A修饰之后表观转录组学的新兴发展方向。
ac4C RNA修饰的检测，易基因采用基于抗体富集的ac4C RNA乙酰化免疫共沉淀 (acetylated RNA Immunoprecipitation，acRIP)技术：基于抗体特异性结合乙酰化修饰碱基原理，以RNA免疫共沉淀富集乙酰化修饰片段为基础，然后通过高通量测序（acRIP-seq），在转录组范围内研究发生乙酰化的RNA区域，高效获得结果。
易基因提供适用于不同科研需求的acRIP -seq技术：
ac4C 乙酰化-常量mRNA acRIP -seq
ac4C 乙酰化-常量mRNA +lncRNA acRIP -seq
ac4C 乙酰化-微量mRNA +lncRNA acRIP -seq
实验原理：
首先通过poly(A)捕获RNA，将获得的RNA打成100nt左右的小片段；之后使用ac4C特异性抗体进行免疫共沉淀，含有ac4C修饰的RNA片段被富集并回收；进而对回收的RNA进行文库构建、高通量测序和生物信息学分析，通过peak分析鉴定出ac4C修饰的位点。
实验策略：
信息分析：
送样要求：
研究案例：
mRNA中胞嘧啶核苷乙酰化可提高翻译效率
Acetylation of Cytidine in mRNA Promotes Translation Efficiency
期刊：Cell
IF：45.5
N4-乙酰胞嘧啶（ac4C）是一种由乙酰转移酶NAT10催化的mRNA修饰。本研究通过对WT和下调NAT10的Hela细胞进行acRIP-seq和mRNA-seq，揭示了ac4C在编码序列中的特异性乙酰化区域富集。NAT10敲除导致在比对mRNA位点的ac4C检测减少，并与靶向mRNA整体下调相关。对mRNA半衰期分析显示，乙酰化mRNA稳定性依赖于NAT10。进一步实验表明，mRNA乙酰化在体内外增强底物翻译。在ac4C peaks的密码子含量分析揭示了在动态位点中胞嘧啶的偏倚表达，从而影响mRNA解码效率。这些发现扩展了mRNA修饰范围（包括乙酰化残基），并阐明了ac4C在mRNA翻译调控中的作用。
acRIP-seq绘制mRNA ac4C图谱
参考文献：
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