还在使用紫外吸收法进行蛋白质定量分析？告别低灵敏度、对样品纯度要求高（如体系中残留的核酸干扰吸光度）的蛋白质定量！
现在，仅需一台 Duetta™ 荧光及吸收光谱仪，操作简单、超低检测限、杜绝残留核酸的干扰，快速实现蛋白质/抗体的定量分析。
图 1 转铁蛋白三维结构
使用10 mM PBS，配制浓度范围为0.75 µg/mL 至 50 µg/mL 的转铁蛋白溶液，用于荧光和吸收光谱测量。使用相同的缓冲液（不含蛋白）作为空白对照。
*实验使用的激发波长为250 nm，发射波长为265 nm到 550 nm，CCD 积分时间为2秒，狭缝为10 nm。本实验使用台式分光光度计作为对比。
01. 吸收光谱模式
图 2 两种仪器的吸收光谱对比
02. 荧光光谱模式
使用 Duetta™ 荧光光谱模式检测转铁蛋白溶液的荧光光谱，如图3所示。对最低浓度的放大结果显示，检测限约为0.75 μg/mL。
图 3 转铁蛋白在0.75 μg/mL- 50 μg/mL 的荧光发射光谱
在0.75 µg/mL 至50 µg/mL 的浓度范围内， Duetta™ 在最大发射波长下的荧光强度、分光光度计测得的吸光度、转铁蛋白浓度的关系如图4所示。图中显示 Duetta™ 对转铁蛋白的检测限约为0.75 μg/mL，荧光强度与浓度呈正相关。对比使用台式分光光度计检测到的最低浓度为25 μg/mL，Duetta™ 的灵敏度高33倍。
这证实了 Duetta™ 在检测蛋白质时具有远高于传统紫外吸收法的灵敏度，因此非常适合用于低浓度蛋白质的定量分析。
图 4 使用 Duetta™ 和分光光度计检测转铁蛋白浓度的比较
本文使用 HORIBA Duetta™ 荧光及吸收光谱仪进行荧光光谱和吸收光谱的测量。Duetta™ 可以同步检测荧光光谱与吸收光谱，是蛋白质定性、定量、聚集分析利器。
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