当DNA的某些序列已知,而需要扩增已知序列两端的未知序列时,可采用反向PCR技术。
原理:用限制性内切核酸酶切割该DNA,随后使用DNA连接酶将获得的酶切产物环化,这样就获得了已知序列两侧携带有未知序列的环状DNA分子。以该已知序列为模板设计一对相反方向的特异性引物:该引物对已知序列反向,但对未知序列却是相向的,从而得以扩增出未知序列。
-END-
公众号(小红书)|神奇生物学
联系方式|qq:147575835
当DNA的某些序列已知,而需要扩增已知序列两端的未知序列时,可采用反向PCR技术。
原理:用限制性内切核酸酶切割该DNA,随后使用DNA连接酶将获得的酶切产物环化,这样就获得了已知序列两侧携带有未知序列的环状DNA分子。以该已知序列为模板设计一对相反方向的特异性引物:该引物对已知序列反向,但对未知序列却是相向的,从而得以扩增出未知序列。
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