武汉大学殷昊教授团队采用RNA连接技术，克服了化学合成RNA的长度限制。通过优化连接条件，成功制备了高产量、高纯度的化学修饰pegRNA和epegRNA（即L-pegRNA和L-epegRNA)（图1）。这种方法生成的L-epegRNA在多种细胞系及两种原代细胞中表现出显著的编辑效率。与通过IVT生成的epegRNA相比，L-epegRNA在RNA递送系统中的编辑效率提高了数百倍。此外，L-epegRNA大幅提升了RNP递送系统中的编辑效率。先前研究表明质粒递送PE能够实现很高效的基因编辑。然而，本研究发现，与质粒递送PE相比，L-epegRNA介导的RNP递送PE显示出更高的编辑效率。
图1. L-epegRNA连接示意图
图2. 连接pegRNA的编辑效率
《自然-生物技术》Nature Biotechnology
DOI: 10.1038/s41587-024-02394-x
Rapid generation of long, chemically modified pegRNAs for prime editing
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