星应用 | 左卡尼汀的测定

文摘   科技   2024-09-11 18:01   中国  


左卡尼汀(L-carnitine也称为左旋肉碱或维生素BT,是一种在人体能量代谢中起关键作用的天然物质。它主要功能是促进脂肪酸的氧化,为细胞提供能量,尤其在心肌和骨骼肌中发挥重要作用。左卡尼汀的发现可以追溯到1905年,俄国科学家Gulewitsch和Krimberg首次从牛肉中分离出肉碱。随后在1927年,Tomita和Sendju确定了其化学结构。1958年,Fritz发现左旋肉碱在脂肪氧化中的基本作用,并揭示了其对人体的重要性。



左卡尼汀的结构式


左卡尼汀是一种两性化合物,亲水性很强,如果没有添加离子对试剂时很难被反相色谱柱(如C18,C8等)保留,可以使用亲水作用色谱(HILIC)开发方法(见亲水作用色谱(HILIC)(一):保留机理知多少),中国药典采用氨基柱,在HILIC模式下保留左卡尼汀,但是方法中存在两个风险:1. 硅胶基质键合的氨基柱在该条件下稳定性偏差(见Horizon®Amino(氨基)柱使用指南);2. 方法中使用的水相为pH 4.7的磷酸盐,而磷酸盐在这个pH的缓冲能力很弱。星谱实验室接到用户委托,希望开发出更稳定的分析方法,经过实验,确定使用Horizon HILIC 5u 250*4.6mm货号/PN:HILIC-250-46-50)可以实现检测目的,可供用户参考。



色谱信息

色谱柱:Horizon HILIC 5u 250*4.6mm货号/PN:HILIC-250-46-50
流动相:20mM磷酸氢二钾(pH6.8):乙腈 = 40:60

波长:205nm

流速:1mL/min
柱温:45℃
谱图:


结论:Horizon HILIC 5u 250*4.6mm货号/PN:HILIC-250-46-50可以实现左卡尼汀的测定,方法更温和、稳定。但是需要注意的是,HILIC模式由于保留机理的独特性,一般需要更长的平衡时间。另外如果是做制剂样品的分析,需要关注亲水性辅料是否充分洗脱出色谱柱,以免残留色谱柱,影响保留时间的稳定性和色谱柱性能的稳定性


色谱柱信息



☆ END ☆

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