细胞培养
Cell Culture
细胞培养是现代生物学和医学研究中一项非常重要的技术，以下我们从其“原理，实验流程，注意事项，用途”等方面进行介绍。
一
实验原理
细胞培养（cell culture）是从生物体中取出某种器官、组织或细胞，在体外模拟体内生理条件对其进行培养，使之生长和繁殖的技术方法。
二
实验流程
（1）仪器试剂与耗材
·无菌的培养皿或培养瓶；细胞培养基；PBS缓冲液；胰酶等试剂。
·离心管，一次性吸管，封口膜，酒精棉等。
·倒置显微镜，细胞培养箱，超净工作台等。
（2）细胞接种
细胞培养分为原代培养（primary culture）和传代培养（secondary culture）。
原代培养
剪碎组织→PBS清洗，离心→分离单个细胞→加入培养液→摇匀放入培养箱
（3）细胞换液
-每天观察培养基颜色，以及镜下观察细胞状态。
-当培养基颜色变黄，及时进行细胞换液，用PBS清洗并更换培养基（2-3天）。
（4）传代
- 当细胞生长密度至70-80%时应进行传代。
- 用PBS洗涤细胞，去除残留培养基。
- 加入胰酶消化细胞，使其脱离培养表面，后加培养基中止消化。
- 收集细胞，离心后重新悬浮。
- 按照一定比例接种到新的培养容器中。
三
注意事项
a) 保持无菌操作，防止污染。
b) 选择适合细胞类型的培养基和培养条件。
c) 避免细胞过度生长或密度过低。
d) 定期观察细胞形态，及时发现异常。
e) 胰酶消化时间要适当，过长会损伤细胞。
f) 传代比例要合适，避免影响细胞生长。
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四
实际用途
a) 细胞生物学研究：研究细胞的形态、功能、信号转导等。
b) 药物筛选和毒性测试：评估药物对细胞的影响。
c) 组织工程：用于构建体外组织模型。
d) 病毒培养：某些病毒需要在贴壁细胞中培养。
e) 蛋白质表达：用于生产重组蛋白。
f) 干细胞研究：研究干细胞的分化和增殖。
g) 癌症研究：研究肿瘤细胞的特性和行为。
细胞培养是生物医学研究中的基础技术，掌握这项技能对于进行细胞相关研究至关重要。通过不断实践和积累经验，研究人员可以提高培养的成功率和效率，为后续实验奠定良好基础。
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图片来源 | 创客贴 欧阳梓望
本期编辑 | 欧阳梓望
责任编辑 | 李王景
审核老师 | 亓晓晴
