在动物实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行检测分析。研究人员需了解动物的循环血量，循环血量取决于物种、性别、年龄、健康及营养状况。对于同一种物种，较大动物的循环血量比较小的动物少，老龄和肥胖动物循环血量少于年轻和正常体重的动物。表1为常见实验动物的循环血量。
采血体积和频率的选择决定于体循环中的血液体积和红细胞更新率。过量采血可导致低血容量性休克、生理应激甚至死亡；当取血量为总血量的15%～20%时，则会出现心排血量或血压降低。取总血量的30%～40% 会引起缺血性休克。为了动物健康考虑，采血量应该是推荐最大量的下限。注意最大采血量是针对正常健康动物制定的；若是疾病或者疾病模型动物，需根据动物的健康情况合理采血。
（1）单次采集：单次最大采血量=体重（kg）×全身血容量（ml/kg）×10%。
（2）多次采集：① 24小时内多次采血总量不能超过血液总体积的15%；② 1周内单次最大采血体积不超过血液总体积的7.5%，总量不能超过血液总体积的15%；③ 2周内单次最大采血体积不超过血液总体积的10%，总量不能超过血液总体积15%；④ 3周内单次最大采血体积不超过血液总体积的10%，采血总量不能超过血液总体积的20%。必要时需检测血常规保证动物无贫血才能进行采血。
（3）采血量不同所需的恢复时间不同，表2列举出单次采血量和24小时内多次采血量恢复所需的时间。
采血方法主要有颈静脉、头静脉、隐静脉/跗外侧静脉、耳缘静脉、股静脉、舌下静脉、尾侧静脉、耳中央动脉、颅大静脉、尾尖切断术及心脏采血。需根据实验动物的品系、采血量、是否需要重复采血、采血技术的掌握程度选择合适的采血方式，表3总结了不同采血方法的优缺点，值得注意心脏采血仅作为实验终点时在麻醉条件下进行。
（1）血浆
(Ⅰ) 乙二胺四乙酸盐（EDTA）采血管：乙二胺四乙酸盐的作用原理是和血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。乙二胺四乙酸盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。但不适用于血小板功能检查和凝血实验检查。
(Ⅱ) 枸橼酸钠采血管：枸橼酸钠的作用原理和EDTA一样，也是和血液中的钙离子结合形成螯合物，阻止血液的凝固。枸橼酸钠和血液的比值是1:9时，适用于凝血实验检查，枸橼酸钠和血液的比值为1:4时，适用于红细胞沉降率的检查。
(Ⅲ) 草酸盐采血管：草酸盐的作用原理也是和血液中的钙离子结合，从而阻止血液的凝固。草酸盐不适用于凝血检查。采血管内添加有惰性分离胶和促凝剂。促凝剂可快速激活凝血机制，加速凝血过程。
（2）分离血清、血浆
分离血浆和血清的一般方法是：3000rpm 离心10~15min。
（1）采血时要避免动物毛发、油脂沾染血液导致溶血，所用的容器、注射器必须清洁干燥，不能有水或者有机溶剂。
（2）抽血时速度不要太快，速度太快会有气泡产生。
（3）抽出的血放入试管时，要先拔掉针头再放血，同时速度不要太快。
（4）若非麻醉采血需避免在动物激烈挣扎的情况下采血。
我们在设计实验方案涉及动物采血时，应综合考虑采血量是否超过最大允许采血量，动物恢复周期是否足够；否则会影响实验动物的健康，动物伦理审查时无法通过。我们需注意的是在动物实验过程中，加强技术人员技能培训提高其专业技能有利于成功采血、降低组织损伤程度以及保障动物的健康和福利，同时可提高血液样本的质量，保证实验数据的稳定性。
参考文献：
《A Good Practice Guide to the Administration of Substances and Removal of Blood, Including Routes and Volumes.》
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作者 | 潘梦鲜
审核 | 彭鱼雁
排版 | 李尖尖
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