qPCR实验操作的几个小细节
一、反应要用到的master mix试剂、引物、模板cDNA最好能分装保存，控制在1-2次实验内用完一管，也就是尽量不要反复冻融这些东西，避免核酸降解或试剂质量下降。
二、配制反应体系时，要在冰上操作，也就是试剂、PCR管/板都放在冰上。如果反应孔很多，要先把mix、引物、水等混合好分去各个孔内，最后再加模板，加模板之前，建议拿一盒新的吸头，每加一个模板到对应的孔内，就取吸头盒里对应位置的吸头，加完后扔掉。这样可以避免加错、漏加。
三、配制完反应体系后，再检查一下反应孔内是否有气泡，有的话一定要清除，可以拿新的干净吸头慢慢挑破，如果有条件的话，可以放在掌上离心机内甩一下，这样可以把管壁上的液体也压下去。
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