【重要】国自然基金委：优青、杰青、创新研究群体要求在FR等国内期刊上发表文章

2024年12月23日，国家自然科学基金委员会（以下简称自然科学基金委）英文期刊Fundamental Research（以下简称FR）第二届编委会第一次会议在北京召开。自然科学基金委党组书记、主任窦贤康出席会议并强调要深入贯彻落实习近平总书记关于科技期刊建设的重要指示精神，努力把FR打造成国际一流学术期刊。

　　党组成员、副主任兼秘书长韩宇，副秘书长韩智勇，FR主编龚旗煌，FR执行主编龙桂鲁，FR副主编李建新、李景虹、高绍荣、陈发虎、唐智勇、胡事民、李一军、程涛，部分优秀编委、优秀审稿人、高影响力论文作者，中国科学技术协会科学技术创新部、中国科学院文献情报中心计量与评价部、有科期刊出版（北京）有限公司和北京科爱森蓝文化传播有限公司的有关专家学者以及自然科学基金委各部门主要负责同志出席会议。会议由韩宇副主任主持。

　　韩宇副主任宣布Fundamental Research第二届编委会主编、副主编组成人员名单、2021~2023年度FR“优秀编委”“优秀审稿人”“高影响论文作者”人员名单。窦贤康主任为主编和副主编颁发聘书，龚旗煌主编、龙桂鲁执行主编分别为优秀编委、优秀审稿人、高影响论文作者代表颁发荣誉证书。

　　窦贤康主任在讲话中强调，2025年自然科学基金委将锚定如期实现科技强国的战略目标，全面贯彻党的二十届三中全会和中央经济工作会议精神，以持续提升科学基金资助效能为主题，强化基础研究的战略性、前瞻性、系统性布局，着力稳定基本队伍盘面，加大青年人才培养力度，稳定推进重大类项目管理改革，积极推进产业基础研究融合升级，加快完善国际合作交流平台，大力营造创新生态，坚定不移地把宝贵科研资源投向最具创新活力的一线科研人员。他指出，中国基础研究所取得的巨大进步，得到世界的公认。

但与中国在基础研究的巨大投入和不断增长的研究实力相比，仍存在两个严重“不对称”——中国的国际学术吸引力不足；拥有的国际一流期刊太少。我们必须给予高度重视，以久久为功的不懈努力尽快改变这一态势。世界一流期刊，是国际学术交流的平台，为科研评价提供有益的参考；是传播科学知识的媒介载体，出版的学术论文对推动科技发展和人类文明进步具有重要贡献。

他强调，要把FR打造成为国际一流学术期刊，一是要大力加强宣传推广，不断提升期刊知名度；二是要提高国际编委的比例，持续推进国际评审；三是要把控刊文质量，始终把发表科学基金资助的原创成果放在首位；四是充分发挥编委作用，发扬科学基金的优良传统，热情服务，大力支持各位专家做好组稿审稿工作。下一步，自然科学基金委要制定引导政策，优秀青年科学基金、创新研究群体等项目结题，国家杰出青年科学基金、卓越研究群体等项目申请延续资助的，要求在FR等国内期刊上发表文章；鼓励优秀本科生、博士生项目把最好的研究成果发表在FR上，努力把FR打造成为反映国家自然科学基金优秀创新成果的品牌期刊。

　　龚旗煌主编在讲话中指出，FR的创立是响应我国不断增强的基础研究实力对国内高水平学术期刊的需求。经过第一届编委会的努力，FR在科技界和期刊出版界得到了较高的关注和认可。第二届编委会要积极发挥领导作用，承担起推动FR期刊发展的使命。同时，希望自然科学基金委出台相关政策，共同来推动期刊高质量发展。

　　自然科学基金委化学科学部常务副主任杨俊林作为FR编委代表发言，科学传播与成果转化中心副主任唐隆华汇报了FR自2021年创刊以来的工作进展。与会专家们围绕期刊组稿约稿、专题策划、审稿、宣传推广、编辑服务、政策支持等展开了充分交流与讨论，提出了宝贵意见。

　　本次会议由自然科学基金委科学传播与成果转化中心主办。自然科学基金委各职能局（室）、科学部、直属单位主要负责同志及相关工作人员，FR主编、副主编，2021~2023年度部分优秀编委、优秀审稿专家、高影响力论文作者及青年编委代表共80多人参加了本次会议。

　　Fundamental Research是由国家自然科学基金委员会主管、主办的综合性英文学术期刊。创刊于2021年，期刊立足反映国家自然科学基金资助的优秀成果，全方位报道世界基础研究前沿重要进展和重大创新性成果，提升中国基础研究和中国科学家在国际科学界的显示度和影响力，为中外科学家打造一个高端的国际学术交流平台。内容涵盖数学物理、化学化工、生命科学、地球科学、工程与材料科学、信息科学、管理科学、健康医学、交叉科学等领域，设置Article、Review、Highlight、Perspective、Commentary等栏目。期刊已被Web of Science核心合集（ESCI）、Scopus、PubMed、瑞典开放存取期刊目录（DOAJ）、美国化学文摘社（CAS）、CSTPCD、CSCD等国内外知名数据库收录，2023年影响因子5.7，位于综合性期刊Q1区。2024年入选中国科技期刊卓越行动计划二期英文梯队期刊项目。

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比如生科院和医学院的：

如医学部有1万左右：

二、国自然中标项目标书全文:

这都是已经中标的标书全文，对我们参考非常有用，部分截图如下：

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对于申报杰青、优青、长江的科研人员，一份已中的PPT模板可以很好的参考，思路逻辑格式等等：

比如优青答辩PPT：

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好了，这些资料我们都已经打包好了放在百度云了，大家赶紧保存到自己的百度云中吧，非常有用。

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CRISPR-Cas9系统是一种基于细菌和古细菌中天然适应性免疫机制的基因编辑工具。它利用Cas9蛋白和一种向导RNA（sgRNA）结合DNA靶点，从而实现对特定基因的敲除或敲降。其原理如下：

CRISPR-Cas9通过向导RNA（sgRNA）识别靶基因，并由Cas9蛋白切割靶DNA产生双链断裂。当sgRNA引导Cas9蛋白到达靶位点后，Cas9会检测靶位点下游是否存在特定的PAM（通常为5'-NGG-3'），且对PAM序列上游第3个碱基和第4个碱基之间进行切割：

随后，细胞通过非同源末端连接（NHEJ，易于引入插入或缺失突变（indels），导致靶基因编码框移位或功能丧失，达到敲除或敲降的目的。）修复引入突变，导致基因失活。

或通过同源定向修复（HDR，如果提供一个模板DNA，细胞可能利用该模板精确修复切口，用于定点突变或插入序列。）进行精确编辑。

我这里举一个例子，如下，比如你的DNA如下，你的sgRNA是靶向GGGCAAGAACGGGGTATTCG：

（snapgene软件安装包点击下载）

那后面的TGG就是PAM序列。cas9蛋白会对PAM序列上游3和4碱基（即TT之间）之间进行切割。那切割之后就是----GGGCAAGAACGGGGTAT TCG----。同时切开后细胞会对DNA进行NHEJ修复。这个时候切口两边的T都可能丢失掉。随后最后你的细胞的DNA最终变为了GGGCAAGAACGGGGTATCG，减少了一个T，也就是发生了移码突变，你的DNA就不会转录出RNA，也不会翻译得到蛋白质了，也就是基因敲除。这只是你筛选的单细胞的一种可能，可能你筛选了50个单细胞，长到6cm皿后做PCR检测序列的时候可能有很多种可能：

目前，比较商业化的CRISPR-Cas9质粒是57818质粒：

这个质粒带有EGFP荧光，sgRNA酶切位点和Cas9蛋白。这个质粒一般是通过BsmBI酶切两个位点切开后，将目的sgRNA替换上去，从而完成目的CRISPR-Cas9质粒的构建：

下面我们教大家如何构建sgRNA质粒（已经验证过的，放心使用）。首先是sgRNA设计(www.swyxzj.com，生物医学之家)：

那，GAGACGTGCGAGAAACTCAA是靶向的DNA序列，靶向的是WNT4基因的第二个外显子，非常不错，不过最理想的是靶向第一个外显子，这样我们移码突变的效果最好。最后我们需要订购的oligo就是(两边是bsmbi连接序列，所以下面这个序列是万能序列，你只要替换中间的sgRNA序列就行，因为酶切位点连接位点是一样的)：

两条oligo，订购的时候记得告诉公司，每一条oligo都需要5端磷酸化（因为有了这个修饰，我们后面才能连接到切开的57818质粒上，没有磷酸化就不能连接或者说连接效率低下）。为了方面做好记录，我们可以将这个sgRNA模拟出来，如下用snapgene,点击action---anneal oligo:

那有个这两个片段，我们就可以模拟最后构建好的57818-WNT4sgRNA质粒，如下：

点击action-insertion cloning--insert fragment:

最后这就是我们的完整质粒啦：

OK，以上为理论，现在我们要开始讲实验啦。首先是订购的单链oligo退火形成双链，体系如下：

GE100007是货号，95到25度，每下降5度后呆5分钟，一直到25度，大约是70分钟。

随后是57818的bsmbi酶切，要注意bsmbi这个酶需要新鲜的DTT，同时这两个位点太近了，所以需要加入FastAP防止自连。37度酶切1.5小时。然后65度20分钟停止酶切和75度5分钟抑制FastAP活性，随后将酶切产物跑胶1.5小时，胶回收，最后测DNA的浓度：

最后是连接，首先将退火的sgRNA双链稀释200倍后用于下面的实验。加入的体系如下（ps：这个体系也是万能体系，反正就是加入100ng的酶切空载，所以你需要修改的就是5.6ul这个数字，根据你自己的来）：

16度酶切16小时，65度10分钟终止酶切。最后就是转化，将质粒转化到大肠杆菌中。从-80℃冰箱中取出对应的感受态细胞DH5a 50uL，室温下置于冰盒上解冻5-10分钟，标记;向感受态细胞中加入5µl的质粒，置于4℃冰箱中,冰浴30min;在42℃水浴锅中热激90s，然后立即在冰盒上放置2min；每管加450µl LB培养基，37℃摇床震荡,220rpm×45min；取100µl 转化液加入对应抗性（这里是AMP+,氨苄抗性）的平板中，涂匀液体；将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养过夜。

最后就是挑取单克隆摇均提取质粒后送公司测序，给公司质粒，并告诉公司用U6-F或者LKO.15测序就行，一般测一个循环1000bp左右：

等你的测序结果一回来就如下比对即可：

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