观察图片可发现，marker旁边两条泳道的蛋白条带非常粗，并且连在一起了。造成这种现象的直接原因，我认为应该是电泳时的蛋白上样量太高导致的。
解决办法很简单，下一次电泳时稀释样品5-10倍后再点样就应该有好转。并且，每一次提取蛋白之后，都应该进行蛋白定量，然后根据实际情况控制上样量，这样才能有效避免再出现这种问题。
以下我们再分享几个SDS-PAGE电泳需要注意的小细节：
1 每个孔的上样体积以多少为准？这个需要具体情况具体分析，常见的3.35mm孔宽、1mm厚的胶，一般不要超过20μL。多了容易溢出来污染其他孔道。
2 每个孔上样的蛋白量建议多少？这一点没有硬性规定，测定蛋白含量后，可以适当调整蛋白浓度，控制每个孔的蛋白含量在20-40微克的范围就行。
3 如果点完marker和样品后，还有其他孔道空余，不应该留空，应该使用loading buffer补齐剩余的孔道。这样可以减少电泳时不同泳道的迁移率不一致的现象。
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