依托成熟的Smart-CRISPR™细胞基因编辑平台和完善的细胞培养体系,赛业生物建立了现货KO细胞库,交付单克隆纯合子,快至1周发货。定制KO细胞服务,使用优化的转染体系将RNP(gRNA和Cas蛋白复合物)直接递送到细胞内,脱靶效率降低明显,能更精准地切割目标DNA序列。
2024年11月13日-12月31日期间,现货KO细胞低至3980元,快至1周,交付单克隆纯合子;定制KO细胞可享多重优惠,“金标准”保证蛋白敲除!
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*注:项目需通过风险评估,且在KO验证抗体资源库中匹配到抗体。
基因敲除细胞系服务优势
➢多重策略保证蛋白敲除
1.KO验证的特异性抗体库:4000多种KO细胞株验证抗体,相关验证数据齐全
2.罕见病数据中心(RDDC)开发的RNA剪接模型工具:预测碱基序列突变后mRNA序列可能发生的剪切情况,辅助筛选ORF移码的单克隆
3.Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统:方案设计全面专业,优先片段敲除方案、敲除抗体结合位点
4.现货KO细胞库:涵盖肿瘤、心血管、神经等20多种研究领域,启动近2万个全基因组敲除细胞库构建计划
*注:项目需通过风险评估,且在KO验证抗体资源库中匹配到抗体。
➢快速交付
可交付单克隆纯合子,定制周期快至1月。
➢更高的特异性和编辑效率
Cas蛋白优化升级,可实现90%以上切割效率及10kb以上大片段敲除。
➢成熟的基因修饰技术平台
从体内动物实验到体外细胞实验,拥有18年基因编辑经验,每年构建体内体外模型超万例,已有多篇文献引用发表,可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。
基因敲除细胞系构建策略
➢移码突变
单个sgRNA介导的基因敲除,通过CRISPR基因编辑系统在编码基因外显子产生InDels造成基因移码突变。
➢片段敲除
两条sgRNA介导的基因敲除,通过两条sgRNA作用于目的片段两侧,实现目的片段序列删除。
规模庞大、品种齐全的科研细胞库
精选客户案例
研究人员从肝细胞癌(HCC)细胞着手开展研究。他们委托赛业生物构建了敲除SOX9的Huh-7细胞和HEK-293细胞,并利用过表达SOX9和YAP的慢病毒载体来评估蛋白功能。他们利用免疫共沉淀、体外pull-down分析、邻位连接分析(PLA)和微量热涌动(MST)分析等来探究蛋白之间的相互作用。
2.眼部疾病|iPSC基因敲除(IF=14.7)
研究人员对大家族中的6名患者和6名正常个体进行了全基因组连锁分析,并通过精细定位和单倍型分析确认致病基因的位置。他们利用短读长和长读长测序平台寻找致病变异,并利用患者的外周血单核细胞构建iPSC,利用Hi-C测序、CUT&Tag和RNA-seq分析来探究平衡易位导致眼组织缺损的机制。之后,他们还利用增强子敲除的iPSC(由赛业生物提供)和斑马鱼模型来验证APCDD1基因的作用。
3.肝癌|TRIM8基因敲除的HepG2细胞(IF=21.8)
研究人员使用了人类HCC细胞系(包括Huh7、Hep3B和HepG2等)进行体外分析,并使用了雄性BALB/c裸鼠进行体内分析。他们采用慢病毒载体来实现TRIM8的过表达,并使用siRNA来降低TRIM8的表达。此外,研究人员还构建了TRIM8敲除的HepG2细胞系(由赛业生物提供),他们发现TRIM8基因的敲除显著抑制了HepG2细胞的增殖和克隆形成。并且利用免疫共沉淀和质谱分析等,研究人员确认了TRIM8与HNF1α之间的相互作用及具体机制。
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