一、微生物碳利用效率的概念及其环境意义
微生物碳利用效率(CUE):微生物分配给生长的碳量占吸收总碳量的比率,体现了微生物合成代谢和分解代谢之间的平衡。其间接决定了微生物残体碳的积累,有助于从微生物代谢角度理解土壤碳动态。
二、实验材料
18O标记水(97%或98%)、灭菌蒸馏水、银杯、50mL顶空瓶、12mL顶空瓶、2mL冻存管、土壤DNA提取试剂盒、移液枪、灭菌枪头、96孔板等。
三、主要仪器设备
视频| CUE实验流程介绍
试样的准备
收集200g左右田间土壤样品,混匀,将其中的大约100g土壤鲜样通过2mm 孔径筛,去除石头和肉眼可见的根等杂质,装入聚乙烯样品袋备用。
●土壤野外采回后迅速过2mm筛,去除土壤内石块、根系、凋落物等;
●烘干法测量土壤含水量土壤;
●尽快将过筛后土壤熏蒸浸提法测量微生物MBC;
(1) 田间持水率的测定
调整土壤含水量到60%田间持水量(WHC,water holding capacity);
将土壤放入实验所需温度培养箱进行预培养,预培养时间遵照实验设计。
(2)预培养土样控水处理。
一个样本一个对照组,或根据样本情况挑选20%样品做对照。
野外采集土壤带回实验室迅速分装冻干提取DNA,并测得DNA含量。
DNA提取液上机测定DNA提取液浓度,并记录数据。
吸取DNA提取液于洁净的银囊(已称重)中并置于60℃烘箱中干燥整夜后(称重)包好,用质谱仪测定18O丰度和总氧含量。
氯仿熏蒸提取法...
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(实验室部分环境拍摄)
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