本期有小伙伴提问硫磺素S染色操作步骤以及注意事项。
硫磺素是一种黄褐色的粉末，由脱氢硫代甲苯胺与磺酸甲基化产生的化合物染料。分为硫磺素T和硫磺素S两种类型。
硫磺素S具有特异性结合成熟的贝塔-淀粉样蛋白（Aβ）的能力，本身自带绿色荧光，并且不产生特征性的激发和发射光谱，因此能产生较高背景的荧光。
硫黄素S有助于对阿尔茨海默病中Aβ斑块进行染色和可视化，在神经退行性疾病研究中发挥着重要作用。下面我们一起来看一下硫磺素S染色的具体实验步骤：
1、 组织切片的预处理：
在进行硫磺素S染色之前，我们对待染色切片进行脱蜡处理。将切片置于蒸馏水中水化，然后放入含有抗原修复溶液的不锈钢高压锅中，加压加热3min。随后将切片置于室温水浴中30min，接着用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤两次，每次5min。随后用高锰酸钾溶液和草酸对切片进行预孵育，然后置于 3% 硼氢化钠溶液中 5min。
2、 染色和分化：
将处理好的切片与溶解在50%乙醇中的0.5%硫黄素S 一起孵育30min。随后在80%乙醇中分化两次，每次10s。乙醇分化完成后需用蒸馏水洗涤3次。
3、 洗涤和封片：
将染色完成的切片置于5× PBS 溶液中于4°C孵育 1h，以停止染色反应并清洁切片表面。随后使用适当的封片剂滴在切片表面，然后将玻璃载玻片轻轻覆盖在切片上，使封片剂均匀覆盖整个切片。以上步骤完成以后我们就可以在荧光显微镜下观察切片中β淀粉样蛋白的聚集情况啦。
4、 注意事项：
硫磺素S是一种染色剂，可能对皮肤造成刺激或染色，在操作过程中，务必佩戴手套以确保安全。另外，在滴加试剂溶液至切片表面时，应避免有气泡存在，确保试剂铺满样品表面，以保证染色效果均匀。同时，在组织切片染色完成后，应即刻进行荧光显微镜观察，避免染色效果因时间变化而产生偏差，影响最终的观察结果和分析。
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